【摘 要】
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目的：探讨钩吻素子(koumine)对H2O2诱导的猪肠道上皮细胞(IPEC-J2)损伤的保护作用及其机制.方法：通过MTT法检测koumine对IPEC-J2细胞增殖的影响,并用H2O2诱导IPEC-J2细胞建立细胞损伤模型,通过MTT和LDH比色法检测分析koumine保护IPEC-J2细胞免受H2O2损伤的效果;酶标仪检测丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性;蛋白免疫印迹(we
【机 构】
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湖南农业大学动物医学院,长沙,410128 湖南省兽药工程技术研究中心、,长沙,410128
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会
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目的：探讨钩吻素子(koumine)对H2O2诱导的猪肠道上皮细胞(IPEC-J2)损伤的保护作用及其机制.
方法：通过MTT法检测koumine对IPEC-J2细胞增殖的影响,并用H2O2诱导IPEC-J2细胞建立细胞损伤模型,通过MTT和LDH比色法检测分析koumine保护IPEC-J2细胞免受H2O2损伤的效果;酶标仪检测丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性;蛋白免疫印迹(western blot)技术检测凋亡相关蛋白bax和bcl-2的表达情况;用流式细胞仪检测氧自由基(ROS)释放量和细胞凋亡率.
结果：检测浓度范围内koumine对IPEC-J2细胞没有毒性;koumine可以通过调控IPEC-J2细胞中SOD活性,LDH漏出率、MDA水平和ROS的产生,保护H2O2对IPEC-J2细胞的氧化损伤,抑制H2O2引起的IPEC-J2细胞凋亡:koumine在抑制H2O2引起的细胞凋亡过程中,减少了促凋亡蛋白Bax表达,升高了抑凋亡蛋白Bcl-2表达,使得Bax/Bcl-2的比值在药物作用时随剂量的增加逐渐降低.
结论：koumine能够保护IPEC-J2细胞对抗H2O2诱导IPEC-J2的氧化损伤,具有一定的时间和剂量依赖关系,其作用机制与抑制细胞凋亡有关.
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