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引言猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的、以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸衰竭为主要症状的一种传染病,该病的广泛传播给全球养猪业带来了巨大的危害。根据基因序列及抗原性差异,可将PRRSV分为以LV为代表的欧洲型毒株及以VR 2332为代表的北美洲型毒株,而我国流行的毒株则主要以北美洲型为主。2006年,我国大部分地区暴发"高热病",并分离到PRRSV变异株,最终确定为高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)。目前我国猪群中既存在经典毒株感染,又有高致病性毒株流行发病,因此加大了本病的防控难度。本研究对PRRSV周口郸城分离株进行全基因组序列测定与分析,以期了解PRRSV的变异特征,为新型疫苗研发提供参考。材料与方法采集疑似PRRS病料(肺脏、脾脏、淋巴结等),经RT-PCR鉴定为PRRSV阳性后,接种Marc-145细胞分离病毒。参照NCBI基因数据库设计14对引物,对所得分离毒株进行全基因组序列扩增,克隆至PMD-18T,测序。用DNAstar和MEGA5.0进行同源性和遗传进化分析。结果与讨论从周口郸城某猪场分离到1株PRRSV毒株,暂命名为ZHOUK-1。全基因组Blast比对结果表明,ZHOUK-1为北美洲型毒株。序列分析发现,ZHOUK-1全基因组序列与欧洲型代表毒株LV同源性较低(60.4%),与2006年后分离的北美洲型毒株同源性较高(96.8%-99.5%)。Nsp2基因变异最大,ORF5次之;推倒氨基酸序列中变异最大的亦为Nsp2,其第481和532-560位处共存在30个氨基酸缺失,与JXA1为代表的国内高致病性分离株序列的同源性较高(90.0%),尤其与JXA1的细胞传代株同源性最接近(99.4%-99.5%),结合进化分析将其划为与JXA1类似的HP-PRRSV。但病例资料显示,送检病猪在30日龄时免疫过某厂家生产的致弱的高致病株(JXA1-R)活疫苗,60日龄左右开始发病。综合以上分析结果,推测ZHOUK-1株可能是由疫苗株JXA1-R演变而来,提示弱毒活苗的使用可能存在毒力返强的风险。此外,该毒株增殖力稳定性好,但对于其致病力及免疫原性仍需进一步研究。结论分离到1株HP-PRRSV毒株,其遗传特征相对稳定,但同时也发生了一定的变异,说明PRRSV还在不断地变异和演化;弱毒活苗可能存在毒力返强的风险。