【摘 要】
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目的：探讨雌激素对离体培养表皮干细胞的生物学作用。方法：密度梯度离心法培养正常人的表皮干细胞(hESCs)，流式细胞仪检测培养的第二代细胞整合素β1，CK10，CK14，CK19抗原表达以鉴定ESCs。实验分3组：(1)：雌激素组(n=9)为表皮干细胞专用培养基(即Epilif培养基)中加入乙烯雌酚(Diethylstilbestrol)配成浓度为0.1 nmol/l(A组);(2)：雌激素受体阻
【机 构】
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广州军区广州总医院整形外科全军激光整形中心,广州 510010 华侨医院医院整形外科,广州 510
【出 处】
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2010中华医学会第七次全国医学美学与美容学术年会暨第三届两岸四地美容医学学术论坛
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目的：探讨雌激素对离体培养表皮干细胞的生物学作用。
方法：密度梯度离心法培养正常人的表皮干细胞(hESCs)，流式细胞仪检测培养的第二代细胞整合素β1，CK10，CK14，CK19抗原表达以鉴定ESCs。实验分3组：(1)：雌激素组(n=9)为表皮干细胞专用培养基(即Epilif培养基)中加入乙烯雌酚(Diethylstilbestrol)配成浓度为0.1 nmol/l(A组);(2)：雌激素受体阻断剂组(n=8)为表皮干细胞专用培养基中加入雌激素受体拮抗剂雷洛西芬(Raloxifenehydrochloride)配成浓度为10 nmol/l(B组);(3)：单纯ESCs培养组即空白组(n=8)单纯培养ESCs(C组)。流式细胞仪检测雌激素组、雌激素受体阻断剂组及空白组的ER-B的抗原表达情况。在倒置显微镜下刮擦生长融合成片的ESCs以制备宽度为100 μm的“离体的单层表皮细胞损伤”模型。模型制备后24、48、72h，倒置显微镜下计数每高倍视野越过创缘迁移到创面的ESCs细胞数，并用sigmaScan pro 5软件计算创面愈合率，用MTT法检测表皮干细胞的增殖分化活性，判断雌激素对ESCs分裂增殖活性的影响。
结果：流式细胞仪检测第二代ESCs整合素B1，ck19，ck14和以ck10抗原阳性率(分别是96.63％，95.47％，94.27％，1.32％)。雌激素组、雌激素受体阻断剂组和空白组的ER—B抗原阳性表达率(66.43％，43.47％，54.27％)。雌激素组、雌激素受体阻断剂组和空白组越过创缘进入创面的细胞在伤后24小时分别(33.6±0.34)，(8.5±0.75)和(11.4±0.45)个/高倍视野;48h分别有(67.5±0.24)，(27.5±0.35)和(38.5±0.45)个/高倍视野;72h分别有(117.5±0.35)，(63.5±0.35)和(78.5±0.45)个/高倍视野。3组伤后72小时创面愈合率分别为(69.00±
0.05)％，(35.00±0.05)％，(48.00±0.06)％。上述指标雌激素组与空白组和雌激素受体阻断剂组具有显著差异(P<0.01)，空白组与雌激素受体阻断剂组比较，差异性显著(P<0.01)。
结论：雌激素具有促进表皮干细胞分裂增殖和迁移的能力，并藉此可能参与皮肤损伤的修复活动。
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