【摘 要】
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目的：构建LXRs过表达的慢病毒载体,感染H9C2细胞.过表达LXRs对高糖诱导的H9C2细胞炎症反应.探讨过表达LXRs改善H9C2细胞炎症反应的机制.方法：运用酶切法基因的质粒中获取Nr1h2和Nr1h3对应的基因片段,获得携带Nr1h2：和Nr1h3：基因重组慢病毒.分为五组:①Control组:用低糖9C2：细胞;②High glucose 组:高糖H9C2 细胞;③LXRα组:感染GV2
【机 构】
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南昌大学第一附属医院心内科 330006
【出 处】
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中华医学会第十五次全国心血管病学大会
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目的：构建LXRs过表达的慢病毒载体,感染H9C2细胞.过表达LXRs对高糖诱导的H9C2细胞炎症反应.探讨过表达LXRs改善H9C2细胞炎症反应的机制.方法：运用酶切法基因的质粒中获取Nr1h2和Nr1h3对应的基因片段,获得携带Nr1h2：和Nr1h3：基因重组慢病毒.分为五组:①Control组:用低糖9C2：细胞;②High glucose 组:高糖H9C2 细胞;③LXRα组:感染GV287-Nr1h3 慢病毒组;④LXRβ组:感染GV287-Nr1h2慢病毒组;⑤GFP组:感染空载慢病毒组.⑸慢病毒感染后,用CCK-8检测各组H9C2 细胞的增殖情况;qRT-PCR：分别检测LXRα、LXRβ和TNF-α、MCP-1、IL-6 的mRNA 表达水平;Western blot和免疫荧光检测NF-κB的蛋白表达变化。结果：qRT-PCR检测LXR a和LXRβmRNA表达结果:LXR a组和LXR β组mRNA表达水平明显上调(P<0.01); 2.CCK-8检测各组H9C2细胞增殖:High glucose组抑制率最高(P<0.01);而LXR a和LXRR组均能降低由高糖引发的抑制率增高，LXR。组降低幅度更明显(P<0.01);3.qRT-PCR检测TNF-a、MCP-1、IL-6 mRNA表达:High glucose组基因TNF- a、MCP-1、IL-6 mRNA表达上调(P<0.01);LXR a和LXRβ组TNF-a,MCP-1、IL-6 mRNA表达下调，4.免疫荧光检测NF-κB p65蛋白核转位:High glucose组和GFP组可见大部分胞核表达较强的红色荧光，LXR a组和LXR β组分别约见40％和68％的胞核表达红色荧光。5.Western blot检测NF-κB蛋白表达结果:High glucose组蛋白表达水平上调(P<0.01);LXR a和LXR β组能下调由高糖诱导的蛋白高表达，LXR a组下调显著(P<0.01)。结论:(1)过表达LXRs能够改善高糖诱导的H9C2细胞炎性反应，其中LXR a具有更显著的抗炎效应。(2)过表达LXRs能够抑制NF-κB的激活，并可能通过这种效应来改善H9C2细胞的炎性反应，LXRa抑制NF-κB的活性更明显;提示NF-κB通路是LXRs改善心肌细胞炎症反应的主要途径之一。
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