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非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)约占肺癌发生率的80％,放射性治疗是NSCLC的重要治疗手段之一.乏氧诱导因子1-α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)是一种重要的转录因子,通过调节各种靶基因的表达,使细胞适应乏氧环境,与肿瘤的恶性程度与预后密切相关.Bcl-2基因作为HIF-1α下游的重要靶基因,通过抑制肿瘤细胞的凋亡,从而使肿瘤组织对放化疗产生抵抗作用.本研究以人非小细胞肺癌H1299细胞为研究对象,观察HIF-1α/bcl-2信号途径对受照射肺癌细胞存活率的影响.采用HIF-1α的突变型(常氧下表达)和野生型(低氧下表达)质粒转染H1299细胞,并以EGFP载体质粒作为转染对照.建立H 1299/M-HIF-1α(常氧下高表达HIF-1α蛋白)、H1299/W-HIF-1α(低氧下高表达HIF-1α)和H1299/F三种细胞株,正常H1299细胞株作为对照组,分别在常氧和CoCl2化学模拟乏氧情况下,对上述4种细胞进行1、2、3、5、7Gy的X射线照射.通过集落形成实验,计算细胞存活分数,采用单击多靶模型进行数据拟合,获得D0和Dq值,进行比较.通过western blot方法观察不同处理条件下细胞内HIF-1α以及bcl-2的表达水平,实验重复3次,以相对光密度值进行统计比较.集落形成实验结果显示,常氧下H1299/M-HIF-1α(D0=4.88)和H1299/W-HIF-1α(D0=3.26)细胞的D0值高于H1299/F (D0=2.92)和H1299(D0=3.01)细胞.H1299/M-HIF-1α、H1299/W-HIF-1α、H1299/F和H1299细胞的Dq值分别为0.42,1.23,0,0.99.Western blot实验结果显示,HIF-1α和bcl-2蛋白在乏氧下的表达水平高于在常氧下的表达水平.细胞内HIF-1α和bcl-2在1-3Gy处于高表达水平,5Gy时开始降低.研究结果表明,HIF-1α通过上调bcl-2的表达,增强受照射细胞的修复能力,减少细胞的凋亡,降低非小细胞肺癌细胞的放射敏感性.