【摘 要】
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目的:通过检测重度子痫前期(severe preeclampsia,SPE)及正常妊娠(normal pregnancy, NP)妇女外周血白细胞中微小RNA let-7家族成员中let-7a、let-7b、let-7g、 let-7i的表达变化,初步探索let-7与PE的相关性,为进一步研究PE的发病机制提供理论基础.方法:收集吉林大学第二医院2015年10月至2016年2月产科住院SPE和NP
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目的:通过检测重度子痫前期(severe preeclampsia,SPE)及正常妊娠(normal pregnancy, NP)妇女外周血白细胞中微小RNA let-7家族成员中let-7a、let-7b、let-7g、 let-7i的表达变化,初步探索let-7与PE的相关性,为进一步研究PE的发病机制提供理论基础.方法:收集吉林大学第二医院2015年10月至2016年2月产科住院SPE和NP妇女新鲜外周血标本.查阅其相关临床资料并记录.PE的诊断标准参照全国统一教材《妇产科学》第8版.本实验选取的各组患者均排除心血管疾病、肝肾疾病、糖尿病及急慢性感染性疾病等妊娠合并症病史.采用miRcute miRNA提取分离试剂盒提取外周血总RNA后,用紫外分光光度仪测定法检测总RNA的浓度、OD值和纯度.总RNA进行逆转录,选用U6作为内参基因,利用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术对microRNA let-7家族中的let-7a、let-7b、let-7g、 let-7i进行扩增.采用SPSS 21.0统计软件和2-△△CT相对定量法处理数据.结果:(1)let-7a、let-7b、let-7g、 let-7i在NP对照组、SPE妇女外周血白细胞中均有表达.(2)经Pearson 和Spearmans相关分析发现,let-7a、let-7b、let-7g、 let-7i在外周血白细胞的表达水平与年龄、体质指数不相关(P> 0.05).(3)let-7a、let-7g在SPE组和NP组外周血白细胞中的表达水平差异有统计学意义(P<0.05).(4) let-7b、let-7i在SPE组和NP组外周血白细胞中的表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论:(1)应用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR结合比较Q值法得到了目的基因let-7a、let-7b、let-7g、let-7i相对于内参基因U6的表达定量,该方法可行,简单且特异性较好.(2)外周血白细胞中let-7a、let-7b、let-7g、 let-7i在NP对照组和SPE妇女均有表达.(3)外周血白细胞中let-7a、let-7b、let-7g、 let-7i表达水平可能与年龄、体质指数(BMI)无关.(4)外周血白细胞中let-7a、let-7g表达水平与SPE存在相关性,具体机制有待深入研究.(5)外周血白细胞中let-7b、let-7i表达水平与SPE不相关.
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