FXYD5基因真核表达载体的构建

来源 :第十届全国检验与临床学术会议暨2015年中国医师协会检验医师年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:softwareuse
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  目的:构建人高尔基复合体相关蛋白(FXYD5)基因真核表达载体,并观察其在真核细胞中的表达,研究肺炎衣原体0147基因与其相互作用方法:提取Hela 细胞的全部RNA,反转录成cDNA,以其作为模板,设计含特异性酶切位点的引物,利用PCR 技术扩增目的片段,经KpnI,EcoRI 双酶切,插入真核表达载体pcDNA3.1+/Flag 质粒中构建成pcDNA3.1+/Flag-FXYD5 重组质粒,转入大肠杆菌XL1-Blue 进行重组质粒的扩增,氨苄青霉素筛选阳性克隆,经过菌落PCR,双酶切,基因测序验证正确后,应用脂质体法转染HeLa 细胞,用间接免疫荧光法检测细胞内FXYD5 基因的表达.
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目的 探讨microRNA-21、microRNA-143 和microRNA-145 在鼻咽癌患者血清中的表达情况及其在复发转移和预后评估中的价值。方法 选取2012 年1 月至2014 年1 月在我院肿瘤内科和头颈外科住院的鼻咽癌患者80 例,80 例健康志愿者作为对照。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测其血清中microRNA-21、microRNA-143 和microRNA-
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Objective: To explore the expressions of AnnexinA2 in the bladder cancer cell lines and bladder cancer tissues.We want to find the relationship among annexinA2,drug resistance,and recurrence of bladde
目的 通过检测患者血清中中性粒细胞载脂蛋白(HNL)、降钙素原(PCT)及C-反应蛋白(CRP)水平,探讨其在早期细菌感染诊断中的作用。方法 选择320 例感染性疾病患者,其中细菌感染患者163 例,病毒感染患者157 例,选取同期来我院体检的129 例健康在校大学生作为正常对照组,比较三组间HNL、PCT、CRP 水平。