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目的:分别构建能表达分泌型和非分泌型gremlinI蛋白的真核表达系统。方法:采用普通PCR技术从本实验组构建的peDNA3.1(+)-gremlinl重组质粒中分别获得全长的大鼠gremlinl基因(gremlinl)和去掉信号肽的gremlin1基因(gremlinl-DS),将它们分别克隆到真核表达载体pEFl/Myc.His C上,经酶切和DNA测序鉴定;分别将两组重组质粒经脂质体转染到非洲绿猴肾细胞株COS.7中,免疫荧光检测两组gremlinI基因的表达。结果:pEF1/Myc-His C·gremlinl和pEF1/Myc-His C·gremlinl-Ds真核表达载体经双酶切鉴定显示大小分别为555bp和483bp;DNA测序与gremlinl基因序列(NM-019282)完全吻合;将它们转染到cos-7细胞后显示,两者均能在细胞内成功表达。结论:成功构建j-pEFl/Myc-His C-gemlml、pEF1/Myc-His C-gremlin1-DS真核表达载体。