不结球白菜Pol胞质雄性不育花酵母双杂交cDNA文库的构建及评价

来源 :中国园艺学会十字花科蔬菜分会第十一届学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:scenery747
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从不结球白菜Pol胞质雄性不育花中提取总RNA后,再利用磁珠法从中分离纯化出mRNA,然后以mRNA为模板,反转录合成cDNA第一链,再在DNA聚合酶作用下,通过长距离PCR,扩增双链cDNA(ds cDNA)。利用SMART技术,通过同源重组的方法,在酵母菌株Y187中构建了不结球白菜Pol胞质雄性不育花的全长cDNA文库。经检测,文库的转化率为1.80×106转化子/μg pGADT7-Rec,文库滴度为1.21×107 pfu/mL,重组率为94%。
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