【摘 要】
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目的:本研究通过病理组织学观察,SPF鸡胚传代分离病毒,PCR扩增和基因测序分析的方法,成功分离出1株鸡包涵体肝炎病毒,为进一步鉴定和分离Ⅰ群禽腺病毒提供依据. 方法:1.病
【机 构】
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扬州大学兽医学院,江苏省扬州市,225009
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会
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目的:本研究通过病理组织学观察,SPF鸡胚传代分离病毒,PCR扩增和基因测序分析的方法,成功分离出1株鸡包涵体肝炎病毒,为进一步鉴定和分离Ⅰ群禽腺病毒提供依据.
方法:1.病理组织学观察;2.SPF鸡胚传代分离病毒;3.提取病毒DNA;4.鸡包涵体肝炎Hexon基因扩增.
结果:组织病理学变化:肝组织淤血,细胞核浓缩,发生坏死,出现包涵体,伴有水泡变性.Hexon基因PCR鉴定:根据已发表的Ⅰ群禽腺病毒hexon全基因的保守区域设计合成了1对引物,用这对引物对病毒的DNA模板进行PCR扩增,结果扩增出与设计片段大小一致的片段.测序分析表明:分离株与Ⅰ群禽腺病毒中血清4型同源性为98.6%,与其他血清型的同源性为68.7%-96.9%,与Ⅱ群禽腺病毒的鸡出血性肠炎病毒和Ⅲ群禽腺病毒的减蛋综合征病毒的同源性为44.6%,最终确定分离病毒为Ⅰ群禽腺病毒.
结论:该病例切片中肝细胞坏死,发生水泡变性,细胞核溶解消失,在肝脏细胞的核中出现嗜碱性和嗜酸性小体,这是鸡包涵体肝炎镜检的典型病变。本研究通过对分离毒株的hexon基因进行序列分析,比较该毒株与禽腺病毒4型标准毒株的核普酸序列,发现本实验分离到的病毒有的基因发生了突变,该突变基因是否与病毒的中和免疫缺失有关尚需进一步研究。分离株与Ⅰ群禽腺病毒同源性最高,亲缘关系最近,特别与血清4型最接近,而与Ⅱ群、Ⅲ群FAV亲缘关系最远,属于不同的进化支。本实验为进一步研究鸡包涵体肝炎病毒打下坚实的基础。
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