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目的:乙型肝炎病毒(HBV)长期感染导致肝脏脂肪变性、肝硬化和肝细胞致癌作用,其中HBV基因组编码的乙肝病毒x蛋白(HBx)在此过程中发挥重要作用;肝细胞脂质蓄积可由脂质调节障碍介导,其中胆固醇转运障碍引起游离胆固醇(FC)增加而与脂质蓄积有关。我们前期发现HBx可诱导肝细胞中环氧合酶2(COX-2)表达增高;本研究旨在探索HBx诱导COX-2的表达在肝细胞中胆固醇转运调节和介导脂质蓄积中的作用。方法:采用人肝癌HepG2细胞株、以及稳定进行HBV基因组复制(含HBx表达)的HepG2.2.15细胞和带有Teton开关的HepG2-Tet-ON-HBx细胞。如下处理建立模型:HepG2细胞,分别瞬转HBV、HBV-x-null和HBx表达质粒;HepG2-Tet-ON-HBx细胞,DOX(1μg/mL)处理48h诱导HBx表达;HepG2.2.15细胞瞬转HBx单克隆抗体(anti-HBx)表达,干预HBx表达;HepG2-Tet-ON-HBx细胞给予PTGS2小干扰RNA(siPTGS2)转染,干预COX-2表达。WB检测COX-2蛋白水平,qRT-PCR检测PTGS2m RNA水平;检测细胞内FC、总TC和TG含量,激光共聚焦显微镜观察细胞中脂滴(LDs)。结果:(1)与对照组相比,HBV蛋白表达的HepG2.2.15细胞中、HBx表达的HepG2-Tet-ON-HBx细胞中,FC、总TC和TG水平增高、脂滴(LDs)增加;anti-HBx处理组细胞中,各指标均降低;提示HBV相关蛋白表达可诱导肝细胞中脂质和FC代谢的改变,与HBx蛋白作用有关;(2)与对照组相比,HBV蛋白表达和HBx表达的HepG2细胞中,PTGS2 mRNA水平和COX-2蛋白表达增高;anti-HBx处理组COX-2蛋白水平下降;与HBV/HBx表达组相比,缺失HBx表达的HBV-xnull组细胞中COX-2未见表达增高;提示HBV相关蛋白表达可诱导肝细胞中COX-2表达,与HBx蛋白作用有关;(3)与siNC组相比,siPTGS2处理组HepG2-Tet-ON-HBx细胞中FC、总TC和TG含量、以及LDs水平均降低。结论:HBx表达参与HBV诱导的肝细胞中COX-2表达增强,经由参与胆固醇转运的调节介导FC依赖性肝细胞胆固醇和脂质蓄积;靶向COX-2表达干预可为HBV/HBx相关肝细胞脂质代谢调节提供潜在靶点。