【摘 要】
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我们对采集于四川部分猪场的病料进行了处理,接种于ST细胞观察病变,并在电子显微镜下看到了病毒.根据GeneBank报道的序列设计了一对引物,通过RT-PCR技术扩增TGEV四川分离株一条包含了S基因中A、B、C、D四个抗原位点的一段基因序列(约1749bp).通过低熔点琼脂糖纯化回收该片段后,将此片段连接在T载体上,再转化在DH52大肠杆菌里,使用双酶切法进行酶切鉴定后进行测序,结果表明,SC-A
【机 构】
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四川农业大学动物科技学院动物生物技术中心,四川雅安,625014
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会
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我们对采集于四川部分猪场的病料进行了处理,接种于ST细胞观察病变,并在电子显微镜下看到了病毒.根据GeneBank报道的序列设计了一对引物,通过RT-PCR技术扩增TGEV四川分离株一条包含了S基因中A、B、C、D四个抗原位点的一段基因序列(约1749bp).通过低熔点琼脂糖纯化回收该片段后,将此片段连接在T载体上,再转化在DH52大肠杆菌里,使用双酶切法进行酶切鉴定后进行测序,结果表明,SC-A株S基因全长1734bp,编码600个氨基酸组成的多肽.该序列与TGEVpurdue株、purdue-115株、TH-98株和T014株的S基因比较,核苷酸的同源性分别为99.9﹪、99.8﹪、99.3﹪、98.3﹪.本实验为以后的S蛋白的表达做好了基础,并为进一步开发诊断试剂奠定了基础.
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根据GeneBank中猪IFN-γ基因设计引物对,利用RT-PCR技术克隆并测定了猪外周血白细胞IFN-γ基因,定名为poIFNR1,其ORF长度为501个核苷酸,其成熟肽包含144个氨基酸.将其成熟肽基因序列根据大肠杆菌密码子的偏嗜性改造后克隆入原核表达载体pBV220中,鉴定后筛选表达重组菌进行发酵培养、温度诱导后,收集菌体超声波破碎后提取包涵体并进行初步纯化,利用胱氨酸-半胱氨酸再氧化法对纯
猪增生性肠炎(PPE)是由细胞内劳森菌(LI)引起的一种猪常见的接触性肠道传染病.临床症状主要表现为间歇性下痢,食欲减退,生长速度减缓,饲料利用率明显下降等.对PPE的病原学、发病机理、流行病学、临床症状、诊断及综合防制等方面进行了介绍.
应用胸膜肺炎放线杆菌套式PCR和实时荧光PCR检测方法分别检测了不同来源的猪鼻拭子、肺、扁桃体等494份样品.套式PCR77份阳性,实时荧光PCR62份阳性,前者的阳性完全覆盖了后者的阳性,两者符合率为97﹪(479/494).两种方法均可应用于猪传染性胸膜肺炎的诊断和监测.
本文对胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖输出基因部分序列的克隆鉴定、序列拼接和分析应用进行了研究。文章在已知5型荚膜多糖输出基因的基础上,对1、3、6、和9型胸膜肺炎放线杆菌的荚膜多糖输出部分基因进行了克隆和测序，从序列上对不同血清型的荚膜多糖输出基因进行了分析。
根据胸膜肺炎放线杆菌的外毒素apxⅠ、apxⅡ、apxⅢ、apxⅣA基因和荚膜多糖cp2基因设计特异性引物7对,进行三次PCR,将16株参考菌株进行血清分型.采用针对apxⅠ、apxⅡ、apxⅢ基因的5对引物进行一次多重PCR,采用针对apxⅣA基因的一对引物以及cp2基因的一对引物分别进行一次PCR.通过5对引物的复合PCR能将15个血清型分成5组,其中第一组包括血清1型、5a型、5b型、9型、
目的:检测我国江苏等9个省市部分地区分离的1007株猪源大肠杆菌中肠细胞脱落位点毒力岛(LEE)和耶尔森菌强毒力岛(HPI).方法:对分离的猪源大肠杆菌采用PCR的方法,检测LEE核心区的ler和eaeA基因和HPI的irp2和fyuA基因,并对LEE和/或HPI大肠杆菌进行了O血清型的鉴定.结论:2.7﹪的猪源大肠杆菌携带LEE,12.7﹪的菌株携带耶尔森菌HPI,O93和O107为猪源HPI大
目的:克隆分析中国特有小型猪来源的猪内源性反转录病毒(PERV)囊膜基因(env),比较不同来源毒株的异同及系统进化关系.方法:应用RT-PCR的方法分别从中国实验小型猪、巴马香猪及五指山小型猪外周血淋巴细胞中扩增PERVenv基因,克隆入T载体后测序;随后以PCR方法对克隆PERVenv基因进行分型检测;最后采用DNAsis及DNAstar软件对克隆的env基因和国外毒株env基因进行同源性及系
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本文对伪狂犬病病毒、猪细小病毒和流行性乙型脑炎病毒检测基因芯片的构建及检测技术进行了研究。文章围绕PRV-PPV-JEV检测基因芯片靶基因克隆及鉴定、PRV-PPV-JEV检测基因芯片的构建、PRV-PPV-JEV检测基因芯片检测技术进行了论述。