【摘 要】
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目的：从自建的大容量非免疫Fab噬菌体抗体库中筛选具有抗甲型肝炎病毒(HAV)抗原活性的噬菌体抗体,并进行鉴定。 方法：采用纯化的甲型肝炎病毒作为包被抗原,对自建的容量为1.
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所,昆明市,650118
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目的：从自建的大容量非免疫Fab噬菌体抗体库中筛选具有抗甲型肝炎病毒(HAV)抗原活性的噬菌体抗体,并进行鉴定。
方法：采用纯化的甲型肝炎病毒作为包被抗原,对自建的容量为1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌体抗体库进行富集和筛选,分别对原始库和筛选后的抗体库进行Phage-ELISA检测。经酶切鉴定和DNA测序分析后进行蛋白表达.
结果：经2轮筛选,抗HAV抗原的噬菌体抗体得到了明显富集,ELISA实验证实具有良好的抗甲肝病毒抗原特异性。SDS-PAGE检测显示Fab抗体蛋白在E coll DHsa中得到了表达.
结论：从自建的非免疫Fab噬菌体抗体库中成功获得了抗甲肝病毒噬菌体抗体,也表明所构建的非免疫抗体库可用于人源性抗体的筛选应用。
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