致病性哈维氏弧菌ToxR基因序列分析与LAMP快速检测方法的建立

来源 :第十届全国水产青年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:castchen
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  从浙江宁波的发病鲈(Lateolabrax japonicus)分离到1株致病性哈维氏弧菌(Vibrio harveyi) LY-1.从该菌的DNA样本中成功扩增出大小为873bp的ToxR基因片段.DNA序列分析表明:该序列与已登录哈维氏弧菌ToxR基因同源性为96.57%,与副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)、鳗弧菌(V.anguilarum)、创伤弧菌(V.vulnificus)的ToxR基因同源性分别为为72.49%、60%、59%,与费氏弧菌(V.fisheri)、溶藻胶弧菌(V.alginolyticus),霍利斯弧菌(V.hollisae),拟态弧菌(V.mimicus),河弧菌(V.fluvialis)的ToxR基因相似性仅为27.62%~58.55%.选择哈维氏弧菌种内保守区段,设计1套LAMP特异引物,对扩增条件进行优化实验,在6 5℃孵育45min的条件下即可完成哈维氏弧菌特异性扩增,成功建立了海水致病菌--哈维氏弧菌的LAMP快速检测方法.结果分析表明:该方法对哈维氏弧菌DNA的最小检出量为1fg,比PCR法灵敏度高三个数量级.利用LAMP方法快速检测哈维氏弧菌,目前在国内外还未见报道.
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