【摘 要】
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为了验证渔源无乳链球菌表面免疫原性蛋白(Surface immunogenic protein,Sip)是否具有免疫保护效果.本实验利用PCR方法对引起海南罗非鱼暴发性疾病的病原菌无乳链球菌HNL
【机 构】
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浙江省淡水水产研究所,浙江 湖州 313001
【出 处】
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第十届长三角科技论坛水产科技分论坛暨2013年浙江省渔业科技论坛
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为了验证渔源无乳链球菌表面免疫原性蛋白(Surface immunogenic protein,Sip)是否具有免疫保护效果.本实验利用PCR方法对引起海南罗非鱼暴发性疾病的病原菌无乳链球菌HNLFYL4株的Sip基因进行扩增,通过pET28a(+)载体构建HNLFYL4株Sip基因的表达载体pET28a-Sip,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,通过SDS-PAGE分析,显示与预期大小约49KD相吻合的融合蛋白带,诱导4h后目的蛋白获得了高效表达.用罗非鱼为模型动物,腹腔注射不同剂量的重组表达的蛋白,用无乳链球菌HNLFYL4株攻毒检测其保护效率,其相对保护率分别为59.3%、70.3%、66.7%.研究证实,无乳链球菌表面免疫原性蛋白作为抗原免疫罗非鱼,能提供良好的免疫保护效果,这为无乳链球菌基因工程亚单位疫苗的开发奠定了基础.
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