【摘 要】
：
目的 探讨CIRP 的表达对人肾小管上皮细胞HK-2 细胞株缺血再灌注损伤的保护作用.方法 构建人pEGFP-C1-CIRP(pEGFP-C1-hCIRP)质粒.取处于对数生长期的HK-2 细胞接种于6 孔板,待细胞汇合度达到80 ％左右时用Lipofectamin 2000 行化学转染(Lipo:plasmid=6ul:3ug),同时设立阴性对照组.转染后24h 在荧光显微镜下观察GFP 荧光蛋
【机 构】
：
武汉大学中南医院;中南大学湘雅三医院 武汉大学中南医院
【出 处】
：
2015中国器官移植大会暨第二届中国器官移植医师年会
论文部分内容阅读
目的 探讨CIRP 的表达对人肾小管上皮细胞HK-2 细胞株缺血再灌注损伤的保护作用.方法 构建人pEGFP-C1-CIRP(pEGFP-C1-hCIRP)质粒.取处于对数生长期的HK-2 细胞接种于6 孔板,待细胞汇合度达到80 ％左右时用Lipofectamin 2000 行化学转染(Lipo:plasmid=6ul:3ug),同时设立阴性对照组.转染后24h 在荧光显微镜下观察GFP 荧光蛋白的表达.将转染成功的细胞换用不含血清的培养基后置于缺氧培养箱(5 ％CO2,95 ％N2)中培养.12h 后换用含10 ％小牛血清的培养基后置入正常培养箱中培养.继续培养12h 后提取各组细胞蛋白.用Western blot 检测各组细胞CIRP、Bcl-2、Bax、TRX 的表达量.
其他文献
目的 采用甲壳素微球和甲壳素/碳纳米管复合微球作为吸附剂,制备新型血液灌流器用于胆红素的吸附,降低黄疸引起的胆红素偏高,以缓解胆红素对肝脏和各个器官的损害,为重症肝病的进一步治疗创造条件.方法 将新型甲壳素微球、甲壳素/碳纳米管复合微球经过筛、酸、碱、乙醇和水处理,装罐后高压灭菌备用,微球用量为灌装体积的3/4,使用前用电解质溶液预充;分别采用体外黄疸血浆灌流和血液灌流、以及动物体内循环的黄疸血浆
目的 研究低温机械灌注(Hypothermia machine perfusion,HMP)灌注液中加入白藜芦醇后对大鼠肝脏热缺血损伤的保护作用,并进一步阐明其作用机制.方法 60 只大鼠随机分为12 组,分别为肝脏热缺血15 分钟,30 分钟,45 分钟组,不同热缺血时间组下分为常规低温保存组,常规低温保存+白藜芦醇处理组,常规低温机械灌注组,常规低温机械灌注+白藜芦醇组4 个亚组,每组5 只.
干细胞是具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞,具有向包括肝细胞在内的方向分化,再生和修复肝脏的能力.骨髓干细胞属于成体干细胞中的一种,主要包括造血干细胞和间充质干细胞.当发生急慢性肝衰、慢性失代偿性肝硬化等肝脏疾病时,肝细胞大量坏死,肝功能迅速恶化,肝再生能力不足,但受限于供肝短缺,干细胞移植成为新的治疗途径和研究热点.本综述就骨髓干细胞移植促进肝再生、移植途径、再生的微环境等方面展开讨论.
目的 研究低温机械灌注(Hypothermia machine perfusion,HMP)对于大鼠热缺血肝脏损伤的保护机制.方法 30 只大鼠随机分为6 组,分为肝脏热缺血15 分钟,30 分钟,45 分钟组,不同热缺血时间组下均分低温保存组,低温机械灌注组,每组5 只.夹闭门静脉,肝动脉和胆道,松解肝脏周围韧带切断侧枝循环,建立热缺血模型,取下大鼠肝脏后分别按分组给予处理 6 小时后获取肝脏标
器官移植是治疗终末期疾病的重要手段,而供体器官的质量是影响移植成功率的决定性因素.为了缓解供体器官短缺的问题,扩大标准的供者(extended criteria donor,ECD)器官移植不断增多,而ECD 的热缺血时间增加,导致供体器官质量受到不同程度的损伤.研究表明,亚低温(32℃-35℃)有降低组织缺血再灌注及氧化应激损伤的作用,能有效地维护器官质量和修复器官损伤,是器官移植领域新的热点.
目的:研究CD11c+F4/80-肾脏固有树突状细胞(renal resident DC,rDC)在肾脏缺血再灌注损(Ischemia Reperfusion,IR)伤中的作用及机制.方法 采用C.FVB-Tg(Itgax-DTR/GFP)57Lan/J 小鼠(以下简称DTR/GFP 小鼠)经不同剂量白喉毒素(DT)处理18h 之后,检测rDC 清除效果及小鼠体重变化,建立缺血再灌注模型,于再灌注
目的 建立小鼠肾脏亚低温模型,并检测不同时间内冷诱导RNA 结合蛋白(CIRP)的表达,为阐明CIRP 在DCD 供肾中的作用打下基础.方法 取15 只雄性BALB/c 小鼠随机分成5 组,每组3 只.1 ％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后置于25℃的环境中(环境低温法),并用电子温度计监测小鼠肛温.当小鼠肛温降至32±1℃时开始计时,适时追加麻药,分别于0h、2h、4h、6h、8h 后迅速取出小鼠肾脏标
目的 探讨肾脏亚低温预处理对缺血再灌注后肾功能损伤的保护作用.方法 取30 只雄性BALB/c 小鼠随机分成3 组,每组10 只.亚低温预处理组:利用环境低温法(如前述)将小鼠体温降至32±1℃并维持2 小时.常规消毒铺巾后取下腹正中切口进入腹腔,用棉签推开肠道,打开后腹膜,用小动脉夹夹闭左侧肾动脉、肾静脉35min 后复通,同时切除右侧肾脏.单纯缺血再灌注组:正常体温小鼠腹腔注射麻醉,取下腹正中
目的 探讨亚低温预处理对肾脏缺血再灌注后氧化应激损伤的保护作用.方法 取30 只雄性BALB/c 小鼠随机分成3 组,每组10 只.亚低温预处理组:利用环境低温法将小鼠体温降至32±1℃并维持2 小时.取下腹正中切口进入腹腔,打开后腹膜,用小动脉夹夹闭左侧肾动脉、肾静脉35min 后复通,同时切除右侧肾脏.单纯缺血再灌注组:正常体温小鼠腹腔注射麻醉,取下腹正中切口,用小动脉夹夹闭左侧肾动脉、肾静脉
目的 下调冷诱导RNA 结合蛋白(CIRP)的表达,观察HK-2 细胞对缺血缺氧耐受能力的变化..方法 构建人pGFU6-hCIRP 干扰质粒.取处于对数生长期的HK-2 细胞接种于6 孔板,待细胞汇合度达到80 ％左右时用Lipofectamin 2000 行化学转染,同时设立阴性对照组(pGFU6 组).转染后24h 用Western blot 检测各组CIRP 蛋白的表达情况.取处于对数生长