【摘 要】
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目的：探索以Lentivirus(慢病毒)为载体,构建同时携带并表达多基因的基因工程人胚神经干细胞(HumanNeuralStemCell,hNSC)的可行性,以便为脊髓损伤研究提供材料. 方法：①培养
【机 构】
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成都军区昆明总医院骨科,四川,成都
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目的：探索以Lentivirus(慢病毒)为载体,构建同时携带并表达多基因的基因工程人胚神经干细胞(HumanNeuralStemCell,hNSC)的可行性,以便为脊髓损伤研究提供材料.
方法：①培养和鉴定hNSC;②用携带绿色荧光蛋白(GreenFluorescenceProtein,GFP)和NT-3的慢病毒转染hNSC;③用荧光显微镜观察、鼠胚背根神经节培养(DorsalRootGanglion,DRG)和Slotblot等方法检测基因工程hNSC的多基因表达.
结果①获得了大量的hNSC;②荧光显微镜观察到几乎100﹪的hNSC表达GFP;③基因工程hNSC的培养液能促使DRG旺盛生长;④SlotBlot检测到基因工程hNSC能高效分泌NT-3蛋白.
结论成功构建了同时携带并稳定表达多基因的基因工程hNSC,为脊髓损伤基础研究及进一步临床应用提供有价值的细胞资源,具有广阔应用前景。
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