姜黄素对BPA诱导人肝细胞L02胰岛素抵抗的改善作用及机制研究

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目的流行病学调查、动物及细胞实验均表明环境内分泌干扰物双酚A(bisphenol A,BPA)暴露与胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)及糖尿病的发生发展密切相关。IR指胰岛素的靶器官或靶组织(主要是脂肪组织、肝脏、骨骼肌)对胰岛素敏感性及反应性降低,致正常量的胰岛素产生的生物学效应低于正常水平,IR发生发展与长期慢性非特异性炎症密切相关。姜黄素是一种多酚类化合物,提取自姜科姜黄属植物姜黄、莪术、郁金等的根茎中,研究发现姜黄素具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等作用,此外还可改善高脂诱导的胰岛素抵抗。本研究采用BPA诱导人肝细胞LO2建立胰岛素抵抗细胞模型,观察姜黄素对BPA诱导LO2细胞胰岛素抵抗及炎症信号通路的影响,探讨其改善胰岛素抵抗可能的分子机制。方法建立BPA诱导胰岛素抵抗人肝细胞LO2模型,用不同浓度姜黄素进行处理,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测葡萄糖水平并计算葡萄糖消耗量,比色法测定丙二醛(MDA)水平,ELISA测定细胞因子TNF-α, IL-6水平,Western Blot法检测胰岛素信号通路、MAPK和NFKB信号通路中相关蛋白(p-IR, p-AKT, p-IRS1, p-p38, p-JNK, p-p65)表达水平。并分别用JNK抑制剂SP600125、p38丝裂原活化蛋白激酶p38MAPK抑制剂SB203580和NF-κB抑制剂与姜黄素同时处理胰岛素抵抗细胞模型,观察对葡萄糖消耗量和胰岛素信号通路的影响。结果姜黄素可显著增加BPA诱导的LO2细胞葡萄糖消耗量减少,显著上调胰岛素抵抗状态下p-AKT,p-IR蛋白表达水平,下调p-IRS1表达水平,表明姜黄素可改善BPA诱导的胰岛素抵抗。姜黄素降低BPA诱导LO2细胞IL-6和TNF-α和MDA的分泌,抑制激活的p38, JNK和NF-κB通路。用JNK抑制剂阻断信号通路后,姜黄素改善BPA所致LO2细胞胰岛素抵抗的效应显著降低,而阻断P38和NF-KB抑信号通路无显著影响。结论姜黄素可改善BPA诱导LO2细胞胰岛素抵抗,其机制可能与改善胰岛素信号转导,抑制JNK通路,减轻氧化应激和炎症水平有关。
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