【摘 要】
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目的:利用低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)模型,观察NotCh3信号对细胞增殖和钙离子通道的影响,探讨Notch3在低氧HPASMCs增殖中的作用及机制.方法:采用P3-P8代HPASMCs
【机 构】
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首都医科大学附属北京朝阳医院医学研究中心
【出 处】
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中华医学会第六届全国肺栓塞与肺血管病学术会议暨第四届国际肺循环病研讨会
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目的:利用低氧诱导的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)模型,观察NotCh3信号对细胞增殖和钙离子通道的影响,探讨Notch3在低氧HPASMCs增殖中的作用及机制.方法:采用P3-P8代HPASMCs的培养细胞,饥饿24h后,换为低血清培养基分别在常氧(21％02)和低氧(3％02)培养.采用DAPT或Notch3-siRNA细胞转染抑制NotCh3信号.MTT法和Brdu法检测细胞增殖;钙成像法检测细胞基础钙、CPA诱导的钙释放和细胞库容性钙内流的改变;Western Blot检测Notch3NICD蛋白表达.结果:1.与常氧比较，低氧48h时HPASMCs增殖显著增加(P<0.01);2.Notch3抑制剂DAPT能显著抑制低氧诱导的HPASMCs增殖(P<0.01);3.转染Notch3-siRNA显著抑制低氧诱导的HPASMCs增殖(P<0.01);4.低氧处理的细胞中CPA诱导的钙释放(P<0.001)和CCE(P<0.001)均显著增高，DAP丁能明显降低低氧诱导的CPA峰增高(P<0.001)和CCE峰增高(P<0.001);5.低氧时HPASMCs中Notch3NICD表达量显著增高(P<0.01)，DAPT和Notch3-siRNA明显抑制Notch3NICD表达。结论:低氧刺激可能通过Notch3信号增加细胞的CCE，促进人肺动脉平滑肌细胞增殖;抑制Notch3能够降低CCE并抑制低氧诱导的HPASMCs增殖。
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