【摘 要】
:
细菌的胞外核酸酶对于细菌的毒力、生物被膜的形成、利用胞外DNA获取营养和降解胞外诱捕网(NETs)中的DNA中起着重要作用.然而,结核分枝杆菌胞外核酸酶则没有相关报道.在此我们证实了Rv0888是结核分枝杆菌的一个胞外核酸酶.在大肠杆菌中表达并且纯化Rv0888蛋白,Rv0888蛋白发挥活性需要二价离子的辅助,其最佳的温度和pH分别为41C和6.5.进一步的研究证实了四种中药单体能够抑制Rv088
论文部分内容阅读
细菌的胞外核酸酶对于细菌的毒力、生物被膜的形成、利用胞外DNA获取营养和降解胞外诱捕网(NETs)中的DNA中起着重要作用.然而,结核分枝杆菌胞外核酸酶则没有相关报道.在此我们证实了Rv0888是结核分枝杆菌的一个胞外核酸酶.在大肠杆菌中表达并且纯化Rv0888蛋白,Rv0888蛋白发挥活性需要二价离子的辅助,其最佳的温度和pH分别为41C和6.5.进一步的研究证实了四种中药单体能够抑制Rv0888核酸酶活性.基于序列分析,Rv0888核酸酶与已知的胞外核酸酶没有同源性,表明Rv0888是一个新颖的核酸酶.定点突变研究结果显示H353,D387,和D438残基对Rv0888的活性起着催化作用.体内感染试验证实了重组耻垢构分枝杆菌Rv0888NS/MS和Rv0888S/MS在小鼠肺中的持留能力明显高于pMV262/MS,并且Rv0888NS/MS和Rv0888S/MS在小鼠的肺中能产生明显的病理变化.表明Rv0888是分枝杆菌感染和致病性所必须的.
其他文献
将禽白血病(AL)两个亚群克隆化病毒(J:rNX0101和K:rJS11C1)分别与柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)共感染SPF鸡,通过死亡率、生长抑制、免疫抑制、病理变化、卵囊排出以及病毒清除率等评价对宿主致病性,进一步通过肠道菌群宏基因组学和脾脏蛋白组学技术阐述共感染致病的分子机制.结果 显示,成功构建ALV分离株JS11C1的传染性克隆,全序列比较显示它可能属于ALV新亚群.不同亚群AL
血吸虫病依然是一种危害人类健康的重要寄生虫病,全世界约有2亿人感染血吸虫。我国是日本血吸虫病流行的主要国家。童虫和成虫是日本血吸虫的两个重要生活阶段,虫体排泄分泌蛋白在免疫逃避中发挥重要作用。本研究通过iTRAQ和液质联用技术,完成了日本血吸虫14天童虫和42天成虫排泄分泌蛋白的比较分析,最终鉴定到298种差异蛋白。其中,童虫高表达蛋白有161个,生物信息学分析显示这些蛋白主要参与抗应激、碳水化合
丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPI)在维持组织内环境稳态,促进细胞的存活以及维持宿主防御过程中起到重要作用.到目前为止,已经在多种组织,如动物、植物、细菌、病毒以及寄生虫体内,鉴定出多种SPIs.本研究中,我们从旋毛虫体内鉴定出两种SPIs,分别为Tsp03044和TspAd5.我们通过原核表达系统高效表达了这两种重组蛋白.序列分析结果显示Tsp03044和TspAd5分别属于TIL和serpin超家族,
旋毛虫病是一种再度肆虐的疾病,是由旋毛虫感染引起.在此研究中研究了旋毛虫组织蛋白酶F (TsCF1),将TsCF1进行克隆表达并研究其生物学特性.序列分析表明TsCF1编码366aa,在组织蛋白酶的前体中存在组织蛋白酶F特异性的基序ERFNAQ样基序KLFNAQ序列,同源序列分析表明TsCF1与其余的蠕虫组织蛋白酶F序列具有高于40%的序列一致性,并且系统进化分析表明TsCF1与吸虫组织蛋白酶Fs
为系统研究中国家禽衣原体的流行率和多样性,本项目采集了全国24个地区活禽市场健康禽类(鸡、鸭、鹅和鸽子)的咽拭子和泄殖腔拭子样品,用于衣原体23S rRNA基因的FRET-PCR检测,结合高熔解曲线分析和进一步的测序鉴定衣原体种类.结果 表明,衣原体的总阳性率为26.2% (602/2,300),本研究在世界范围内首次于禽类报道猪衣原体和鼠衣原体.家禽衣原体是主要的流行种类,占阳性家禽的63.8%
本课题组前期成功克隆了贝氏隐孢子虫(C.Bailey) Rhomboid基因,构建了真核表达载体pEGFP-CbROM,其能够在HEK293细胞中表达.本研究利用已构建好的重组质粒pEGFP-CbROM免疫雏鸡,观察其对动物体诱导产生的免疫应答反应,经口接种贝氏隐孢子虫卵囊进行人工感染,评价该质粒对贝氏隐孢子虫感染的免疫保护效果.结果 表明,与不免疫不感染组、不免疫感染组和pEGFP空质粒免疫组相
为摸清内蒙古主要牧区放牧绵羊胃肠道线虫的流行状况及主要线虫耐药性情况,课题组在呼伦贝尔和锡林郭勒牧场进行了相关研究.粪便虫卵检测结果显示:两个地区放牧绵羊寄生虫在第二季度平均感染率均最高,分别为91.3%和83.2%;平均最低感染率发生的时间则有所不同,呼伦贝尔地区在第四季度最低为29.3%,而锡林郭勒地区却在第三季度达到最低的52.1%,在第四季度略有升高,为53.7%.对锡林郭勒地区绵羊剖解结
病毒识别受体是病毒感染的第一步,决定着病毒感染细胞的类型和宿主嗜性.FMDV通过识别RGD位点结合整联蛋白受体(αvβ1、αvβ3、αvβ6和αvβ8).整联蛋白αvβ3在许多信号转导、细胞凋亡和肿瘤血管生成中起到重要作用.为了深入研究整联蛋白αvβ3的功能和作用,用高效慢病毒介导的基因转导技术,构建了稳定表达αvβ3异二聚体的CHO-677细胞系,用PCR和IFA分别从基因和蛋白水平检测了αv和
[目的]牛A型多杀性巴氏杆菌(Pm)耐药性的产生为其引发疾病的治疗增添了困难,为此本研究对Pm耐药性和常用药物的分子耐药机制进行研究,为该病原耐药抑制剂的研发奠定基础。[方法]首先对病原进行耐药性检测,分析耐药表型和基因型,然后采用PCR和分子对接对喹诺酮和大环内酯药物靶位进行分析。同时采用CCCP和MRM对外排蛋白进行检测。最后构建RNA-Seq测序文库,筛选耐药株差异表达基因。[结果]23株菌
探讨脂筏在牛呼吸道合胞体病毒(Bovine respiratory syncytial virus,BRSV)感染MDBK细胞中的作用。采用胆固醇去除药物MβCD处理MDBK细胞后,结果显示,细胞膜胆固醇含量明显降低,同时降低BRSV病毒感染水平,补充外源胆固醇后,病毒感染力可部分恢复,表明细胞膜胆固醇的去除可以抑制BRSV的感染,BRSV的感染可能和细胞膜脂筏相关。进一步研究发现,胆固醇去除不会