【摘 要】
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目的：制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白2a (MRSA-PBP2a)抗原的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),建立检测MRSA的乳胶凝集方法.方法：采用体外诱导的方法制备PBP2a蛋白,胸部肌肉多点注射方式免疫6只海蓝蛋鸡,水稀释法提取IgY,BCA法测定蛋白含量,Western blotting进行特异性分析,用提取的IgY抗体致敏聚苯乙烯乳胶,建立检测PBP2a的乳胶凝集方法.结果：成功诱
【机 构】
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襄樊学院附属医院襄阳市中心医院检验科 襄阳市中心医院重症医学科,襄阳 441021
【出 处】
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第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛
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目的：制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白2a (MRSA-PBP2a)抗原的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),建立检测MRSA的乳胶凝集方法.方法：采用体外诱导的方法制备PBP2a蛋白,胸部肌肉多点注射方式免疫6只海蓝蛋鸡,水稀释法提取IgY,BCA法测定蛋白含量,Western blotting进行特异性分析,用提取的IgY抗体致敏聚苯乙烯乳胶,建立检测PBP2a的乳胶凝集方法.结果：成功诱导并制备获得纯化的PBP2a蛋白,首次免疫后1月每枚鸡蛋提纯后可获得约48mgIgY抗体,Western blotting结果显示IgY抗体能有效识别纯化的PBP2a蛋白；成功建立检测PBP2a的乳胶凝集法,敏感性达1mg· L-1.结论：抗MRSA-PBP2a鸡卵黄抗体具有较高的敏感性和特异性,基于其建立的乳胶凝集检测方法具有较好的灵敏性.
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