【摘 要】
：
目的 阐明SARA调控高葡萄糖诱导的肾小管上皮细胞EMT及ECM沉积的分子机制.方法 用高葡萄糖(30mM D-葡萄糖)刺激HK-2细胞,Western blot及Realtime PCR检测TGF-β1、Smad2、Smad3表达,Western blot检测p-Smad2、p-Smad3的表达水平;转染全长SARA质粒及SARA(dSBD)质粒,再予高糖刺激,检测Smad2、Smad3、p-S
【机 构】
：
中南大学肾脏病研究所中南大学湘雅二医院肾内科湖南省肾脏疾病与血液净化重点实验室
【出 处】
：
2011中华医学会肾脏病学分会血液净化论坛暨黑龙江省医学会肾脏病学年会
论文部分内容阅读
目的 阐明SARA调控高葡萄糖诱导的肾小管上皮细胞EMT及ECM沉积的分子机制.方法 用高葡萄糖(30mM D-葡萄糖)刺激HK-2细胞,Western blot及Realtime PCR检测TGF-β1、Smad2、Smad3表达,Western blot检测p-Smad2、p-Smad3的表达水平;转染全长SARA质粒及SARA(dSBD)质粒,再予高糖刺激,检测Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3的表达变化.结果 高糖可诱导TGF-β1、Smad3蛋白及其mRNA表达呈时间依赖性上调;Smad2 mRNA表达呈时间依赖性上调,而其蛋白表达呈时间依赖性下调;高糖可促进Smad2和Smad3磷酸化,但Smad3的活化时间更长.过表达SARA可上调Smad2的蛋白表达,但对其mRNA表达水平无明显影响,过表达SARA对Smad3的蛋白及其mRNA表达无明显影响;转染SARA(dSBD)质粒对Smad2、Smad3的表达无明显影响.
其他文献
目的:终末期肾病时(ESRD)有微炎症状态,由其肠道溃疡、水肿、充血、局部炎症、通透性增高等病理生理学的改变推测ESRD时可能有肠道菌群改变,少量肠道菌群移位至血诱发全身慢性炎症.本实验旨在证明ESRD病人的肠道菌群改变并移位至血.方法:选ESRD未替代治疗组(粪便A组、血a组)、ESRD血液透析组(粪便B组、血b组)、正常对照组(粪便C组、血c组)各10人,同时期采集粪便和血,另外采集B组每人透
目的 了解佛山地区各医院的透析设备与透析治疗现状.方法 本地区所有开展透析的单位共18家医院参加了登记工作,填写《佛山市肾内科专业设置及血液净化情况调查表》,登记时间为2008年1月1日至12月31日,进行资料汇总和统计分析.结果 18家医院均开展了血透,同时开展血透和腹透5家(27.8％),单纯开展血透13家(72.2％),并无1家只开展腹透.全市共有血透机194台,较2007年增加39台,CR
房颤是一种比较常见的心血管疾病,大样本的文献研究证实房颤增加了患者死亡率和致残率.本中心的初步统计结果证实维持性透析患者这一特殊人群中同样能得出类似的结论.左房容量反映左室舒张功能.虽然其他左室的多普勒舒张指标都可以受左室功能急性变化的影响,但左房容量这个指标都非常稳定,可以真实反映患者心脏的舒张特性.心房纤颤的发生对透析患者的心功能有无影响值得进一步探讨.其中左房容量是否可以作为预测心房纤颤的预
目的 检测腹膜透析患者腹膜透析流出液细胞中microRNA的表达及EMT发生情况,初步探讨microRNA-129-5p与腹膜间皮细胞EMT的关系.方法 随机选取新开管持续不卧床腹膜透析(continuous ambulatory peritoneal dialysis,CAPD)患者10人,腹透半年以上者12人,分离培养并鉴定流出液细胞;通过micro array得出二者microRNA差异表达
目的:比较不同吸附剂对大鼠血内毒素、TNF-α及IL-6的吸附作用.方法:实验用SD大鼠36只,共分6组,分别用以下6种材料灌流:Ⅰ组为丽珠产HA330大孔吸附树脂;Ⅱ组为AB-8大孔吸附树脂;Ⅲ组为活性炭+人血白蛋白包被;Ⅳ组为乙基纤维素+人血白蛋白包被;V组为乙基纤维素+化学处理+人血白蛋白包被;Ⅵ组为乙基纤维素+化学处理+丁胺卡那+人血白蛋白包被.每组6只大鼠,分别经尾静脉一次性注入大肠杆菌
目的 本实验拟通过研究高糖对体外培养的人腹膜间皮细胞产生活性氧簇(ROS)及转化生长因子β1(TGF-β1)的影响,同时应用不同浓度的抗氧化剂进行干预,以探讨ROS是否能够作为细胞内信号转导分子在高糖诱导腹膜间皮细胞分泌TGF-β1增多中起到一定的作用,为高糖所致腹膜纤维化的发生机制及防治提供线索和思路.方法 采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离HPMCs,建立稳定的体外腹膜间皮细胞培养,第三代用
目的:探讨micorRNA 302c在调节腹膜间皮细胞CTGF表达及EMT发生中的作用和分子机制.方法:(1)将中南大学湘雅二医院及湘雅三医院腹膜透析中心的CAPD患者,按腹透时间分为两组:①新开管组(A组)②腹透一年以上组(B组),取其夜间留腹腹透液分离培养人的腹膜间皮细胞,培养十四天经倒置相差显微镜和免疫组化染色(Immunohistochemistry,HIS)鉴定,后原代细胞用于实验.
目的:通过观察不同浓度葡萄糖腹透液对腹膜间皮细胞(HPMC)galectin-1及EMT相关指标vimentin、zo-1表达的影响,初步探讨galectin-1与EMT的关系.方法:以人腹膜间皮细胞株为研究对象,随机分为4组:正常对照组(5.5mmol/L),1.5％PDS组,2.5％PDS组及4.25％PDS组.采用实时定量PCR (Real-time PCR)测定galectin-1,vim
目的:转染galectin-1 siRNA抑制人腹膜间皮细胞galectin-1的表达,检测vimentin、zo-1的表达,观察galectin-1 siRNA能否抑制高糖腹透液诱导的HPMCs转分化.方法:以脂质体法转染siRNA至HPMC,把HPMC分为3组:正常对照组(未转染HPMC+5.5mmol/L葡萄糖),高糖组(未转染HPMC+4.25％高糖PDS刺激组)和转染组(转染galect
目的 探讨尿毒症毒素ADMA对单层内皮细胞通透性的影响,以及氧化应激、p38 MAPK通路在此过程中的作用.方法 利用transwell小室建立单层内皮细胞屏障结构,设立实验组和对照组,实验组经不同浓度及作用时间的ADMA刺激,或分别经NADPH氧化酶抑制剂、p38 MAPK抑制剂预处理后再加入ADMA刺激.