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目的:构建辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN并研究其体外稳定转染联合X-射线照射对恶性胶质瘤细胞SHG-44增殖、细胞周期进程及诱导细胞凋亡的作用.
方法:以脂质体介导携有外源野生型PTEN基因的辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN,体外转染人胶质瘤SHG-44细胞,筛选稳定转染的细胞克隆并扩增培养,以Westernblot法检测PTEN基因的辐射诱导表达情况,应用流式细胞仪及生长曲线测定等方法研究稳定转染联合0-10Gy X-射线照射对胶质瘤细胞生长速率、细胞周期进程、细胞凋亡等特性的影响.
结果:稳定转染PTEN基因的SHG-44细胞PTEN蛋白的相对表达量可被辐射诱导增强,5Gy以内PTEN蛋白的相对表达量随照射剂量增加而增加.稳定转染联合X-射线照射可明显抑制肿瘤细胞的恶性增殖、使肿瘤细胞周期阻滞于G1期并诱导肿瘤细胞凋亡,5Gy以内随照射剂量的增加,肿瘤抑制作用更明显,早期凋亡细胞百分数明显增加.
结论:体外hPTEN基因-放射联合治疗可诱导肿瘤细胞凋亡明显增多,具有显著的肿瘤抑制作用.