背景传代细胞目前广泛应用于疫苗生产、组织工程及单抗制备等诸多领域,而支原体污染是长期困扰细胞培养的严重问题。支原体污染细胞后,可导致细胞形态、结构及核型发生改变,细胞的生物学活性无法正常发挥,严重影响生产及检定工作的顺利进行。目的进一步完善细胞支原体的检查方法 ,分析PCR检测方法用于细胞支原体检查的可行性。方法应用ABI、Sigma及国产澳亚的PCR法支原体检测试剂对108份经药典方法 (培养法,指示细胞染色法)确证的细胞培养物样本进行支原体检测。结果三种不同的试剂,所有药典方法检测阴性样本均检测为阴性,阴性预期值符合率为100%,而54份药典方法检测阳性的样本中,Sigma试剂仅检出2份阳性(2/54,),阳性率仅为3.7%,ABI的试剂及国产澳亚的试剂阳性检出率均为94.4%(51/54),Sigma试剂检测出阳性率偏低的原因尚无法确定。结论采用PCR方法用于细胞污染支原体检测要慎重选择试剂,这几种方法的检测阳性率与药典方法相比仍存在个别样本的漏检现象,不能取代现有的药典方法 。