【摘 要】
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将Asia Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)全长6.9Kb的ORF克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中,构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-ORF。pVL-ORF与线性化的亲本病毒Bm-BaePAK6 DNA共转染家蚕细胞,经空斑筛选后成功获得携带有FMDV全长ORF的重组病Bm-ORF。通过免疫荧光技术证明重组病毒能够正确表达插入的外源基因。将获得的重组病毒Bm-ORF感染家蚕5龄起幼虫,通过双
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州 730046
【出 处】
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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会
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将Asia Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)全长6.9Kb的ORF克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中,构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-ORF。pVL-ORF与线性化的亲本病毒Bm-BaePAK6 DNA共转染家蚕细胞,经空斑筛选后成功获得携带有FMDV全长ORF的重组病Bm-ORF。通过免疫荧光技术证明重组病毒能够正确表达插入的外源基因。将获得的重组病毒Bm-ORF感染家蚕5龄起幼虫,通过双抗体夹心ELISA法和电镜观察证明目的基因在蚕体中获得较高水平表达并组装成空衣壳。用蚕表达产物作抗原制备疫苗免疫牛,免疫动物均产生了特异性抗体。免疫后21天进行病毒攻击保护试验,获得了2/4的完全保护。
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通过对鸭肿头败血症病毒蜂胶疫苗和油苗的免疫抗体监测、安全性试验、效力试验和病理学研究,表明蜂胶疫苗产生抗体较快、油苗产生抗体持续时间较长,并且能有8/10~9/10抵抗强毒攻击,对照8/10死亡,死亡鸭主要病理变化为实质器官的充血、出血、大量炎性细胞浸润以及肾小管腔内大量蛋白样物质渗出,形成蛋白管形的出现。大脑、肝脏、肾脏均出现假嗜伊红白细胞浸润可能具有证病性意义。
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