【摘 要】
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目的 探讨建立简易新生SD大鼠皮质神经元缺氧模型的方法.方法 取24h内的新生SD大鼠皮质,用木瓜酶和DNaseI共同消化,10% FBS的DMEM/F12培养液终止消化,用10% FBS的DMEM/F12种植培养,4h后换成无血清neurobasal配制的维持培养液,第9-10d用免疫荧光法鉴定神经元的纯度,7-10d用于缺氧模型,缺氧时培养基为无糖DMEM培养液,在37℃,高纯N2环境中缺氧1
【机 构】
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汕头大学医学院第一附属医院新生儿科 515041
【出 处】
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中华医学会第八次全国围产医学学术会议
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目的 探讨建立简易新生SD大鼠皮质神经元缺氧模型的方法.方法 取24h内的新生SD大鼠皮质,用木瓜酶和DNaseI共同消化,10% FBS的DMEM/F12培养液终止消化,用10% FBS的DMEM/F12种植培养,4h后换成无血清neurobasal配制的维持培养液,第9-10d用免疫荧光法鉴定神经元的纯度,7-10d用于缺氧模型,缺氧时培养基为无糖DMEM培养液,在37℃,高纯N2环境中缺氧1-6h,观察皮质神经元缺氧后形态学的变化,根据实验目的选择最适合的缺氧时间,建立缺氧模型.结果 培养第10d,神经元胞体饱满,结构清晰完整,神经元纯度荧光鉴定结果为82.04%.随着缺氧时间的增加,皮质神经元胞体和突起逐渐经历水肿到裂解的过程.结论 我们建立了简易的新生SD大鼠皮质神经元缺氧模型
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