【摘 要】
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鸭瘟病毒感染水禽(鸭、鹅等)常常造成严重的发病和死亡,解析鸭瘟病毒UL54基因及其编码ICP27蛋白的特性和功能,对于阐明鸭瘟病毒的致病机理至关重要。本研究对鸭瘟病毒UL54基因进行克隆、原核表达、蛋白纯化和抗体制备；分别用实时荧光定量PCR和免疫印迹分析转录时相和表达时相；用免疫荧光法对UL54蛋白进行细胞内定位分析；用种间异核体技术解析UL54蛋白的核质穿梭活性及其功能区；构建基于BAC的UL
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鸭瘟病毒感染水禽(鸭、鹅等)常常造成严重的发病和死亡,解析鸭瘟病毒UL54基因及其编码ICP27蛋白的特性和功能,对于阐明鸭瘟病毒的致病机理至关重要。本研究对鸭瘟病毒UL54基因进行克隆、原核表达、蛋白纯化和抗体制备；分别用实时荧光定量PCR和免疫印迹分析转录时相和表达时相；用免疫荧光法对UL54蛋白进行细胞内定位分析；用种间异核体技术解析UL54蛋白的核质穿梭活性及其功能区；构建基于BAC的UL54基因缺失株并评价其特性和对鸭瘟病毒其他基因的表达的影响。结果 表明：①鸭瘟病毒UL54属于立即早期基因,编码蛋白分子量约57KD,主要定位于细胞核；②UL54蛋白具有核质穿梭活性并包含功能性的核定位信号和核输出信号；③④⑤UL54基因的缺失会使病毒的复制能力降低、滴度下降,空斑变小,其他基因(包括UL19,UL30,UL48,gC,gD,gK)表达量下降。
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