【摘 要】
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目的 探讨RNA 干扰沉默小鼠p16 基因表达,对137Cs γ-射线诱导的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)衰老的影响.方法 通过构建p16 RNA 干扰载体,采用实时荧光定量PCR、western blot
【机 构】
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中国医学科学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室 天津市南开区白堤路238号300192
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目的 探讨RNA 干扰沉默小鼠p16 基因表达,对137Cs γ-射线诱导的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)衰老的影响.方法 通过构建p16 RNA 干扰载体,采用实时荧光定量PCR、western blot 和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA -β-gal)染色观察RNA干扰前后辐射诱导衰老的MEF 细胞RNA 水平、蛋白水平和衰老细胞百分率等变化.结果 辐射诱导衰老的MEF 细胞RNA 干扰后24h,p16 mRNA 相对表达水平和蛋白水平明显降低；干扰后五天SA-β-Gal 染色阳性细胞百分率干扰组(34.17±2.08)％和(33.83±1.75)％明显低于照射衰老组(68.83±1.26)％(p<0.01).结论 RNA 干扰沉默小鼠p16 基因表达能够抑制MEF 细胞的衰老,为其在细胞衰老相关研究中的应用奠定了基础.
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