蛋白质溶液的膜结晶技术

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蛋白质科学在材料业、制药业、农业、化学工业中得到越来越多的关注.众所周知,生物高分子的功能与它的分子结构紧密联系.无论我们要了解生物高分子的生物活性或设计在病理学中有特殊靶点的新型药物,都必须先决定分子的特殊结构.蛋白质分子的三维原子解析结构可以通过X-射线或中子结晶学和核磁共振(NMR)得到.运用高新技术得到完美的大尺寸的蛋白质晶体用于衍射分析,以测定蛋白质分子的结构和空间构型,对蛋白质与生物酶的科学研究有着重要的意义.本文介绍了一种新的蛋白质结晶技术——膜结晶,这种技术将膜蒸馏与结晶过程相集成,通过使用微孔的疏水性膜将蛋白质溶液中的溶剂除去,得到适合X-射线衍射分析的蛋白质晶体.实验采用溶菌酶作为标本蛋白,考察了膜结晶过程的操作原理及优点,发现膜结晶可通过控制洗脱液的浓度来调节溶剂的蒸发速率以及减少结晶时间.着重分析了结晶过程中洗脱剂、沉淀剂、添加剂等因数的影响.并对在用NaCl作为沉淀剂,醋酸钠作为缓冲剂的条件下得到的溶菌酶结晶进行了结构分析.
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