【摘 要】
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流行性感冒(简称流感,Influenza)是由流行性感冒病毒(简称流感病毒,Influenza virus,Ⅳ)引起的一种古老的疾病。1997年首次证实AIV(H5N1)可直接感染人类。1999年证实了禽源H9
【机 构】
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解放军军事医学科学院全军基因工程重点实验室;
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流行性感冒(简称流感,Influenza)是由流行性感冒病毒(简称流感病毒,Influenza virus,Ⅳ)引起的一种古老的疾病。1997年首次证实AIV(H5N1)可直接感染人类。1999年证实了禽源H9N2感染人类。2003年荷兰暴发H7N7,感染83人。2003年我国香港又证实了人感染H5N1的报导,并且该毒株与1997年株发生了变异。接踵而来先后有越南、泰国感染禽流感H5N1发病并致死的报告。2005年初,泰国科研小组研究证实禽流感可以通过人际传播。目前世界各国正面临着流感疫情大流行的潜在威胁。当前所用疫苗主要是针对一种或两种流感亚型,难以适应多种亚型共存的新局面。所以,研制能同时预防多种亚型的流感疫苗有重要的意义。本研究基于根据各表位基本独立的要求,结合计算机分析,以H3、H9亚型流感的HA抗原表位,H5、H7亚型的HA全基因,流感病毒的其它主要抗原基因(NP、NA、M)表位为基础,再附以Kozak序列和适当的酶切位点.设计并合成一段长765bp的复合多表位基因Epi,将其克隆人真核表达载体pRIEneo,构建重组质粒pRI-Epi;将多表位抗原基因Epi插入到融合表达基因H57中,构建重组质粒pRI-H57-Epi。将构建的重组质粒在Hela细胞中表达,并用ELISA、免疫荧光方法初步检测该抗原蛋白的抗原性。结果表明构建的融合表达载体pRI-Epi和pRI-H57-Epi在Hela细胞中表达出流感病毒多表位抗原蛋白,ELISA和免疫荧光方法检测显示该蛋白具有良好抗原性。
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