【摘 要】
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通过转录组测序分析结合RACE-PCR方法获得2条三角帆蚌杀菌通透性增加蛋白(bactericidalpermeabilityincreasingprotein,BPI)的cDNA序列,BPI1全长为1865bp,编码区为1506bp
【机 构】
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南昌大学生命科学与食品工程学院,南昌,330031江西师范大学生命科学学院,南昌,330022
【出 处】
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第八届南方六省(粤、湘、鄂、赣、桂、琼)动物学学术研讨会
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通过转录组测序分析结合RACE-PCR方法获得2条三角帆蚌杀菌通透性增加蛋白(bactericidalpermeabilityincreasingprotein,BPI)的cDNA序列,BPI1全长为1865bp,编码区为1506bp,编码501个氨基酸.BPI2全长为2204bp,编码区为1557bp,编码518个氨基酸.二者氨基酸序列相似性为50.3%,前22个氨基酸均为信号肽,成熟的分子均是由N端(BPI1,23-272aa;BPI2,23-284aa)、C端(BPI1,287-495aa;BPI2,299-507aa)和一段中间连接单位(BPI1,273-286aa;BPI2,285-298aa)组成.RT-PCR结果显示2种BPI-mRNA在三角帆蚌血细胞、肝胰腺、鳃、肌肉、外套膜组织中均由表达,但表达量稍有差异.将BPI1的N端、BPI2的N端及BPI1的全长克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,转入大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)内进行原核表达,SDS-PAGE电泳检测,结果表明重组蛋白能够预期表达且均以包涵体形式存在.
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