【摘 要】
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目的:旨在探索调节性T细胞(Tregs)对于肝纤维化的发展是否也有促进作用.方法:收集PC61细胞培养上清液并纯化得到的CD25抗体，注射于CC14诱导的肝纤维化模型小鼠的腹腔，人为降低小鼠体内的CD4+CD25+Tregs水平，观察下调Tregs后的肝纤维化小鼠肝脏变化情况。其中运用流式细胞分析技术检测抗体注射后小鼠CD4+CD25+Tregs水平的变化;运用masson染色鉴定肝纤维化程度;R
【机 构】
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首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心,北京100069
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目的:旨在探索调节性T细胞(Tregs)对于肝纤维化的发展是否也有促进作用.方法:收集PC61细胞培养上清液并纯化得到的CD25抗体，注射于CC14诱导的肝纤维化模型小鼠的腹腔，人为降低小鼠体内的CD4+CD25+Tregs水平，观察下调Tregs后的肝纤维化小鼠肝脏变化情况。其中运用流式细胞分析技术检测抗体注射后小鼠CD4+CD25+Tregs水平的变化;运用masson染色鉴定肝纤维化程度;Real time-PCR、免疫荧光技术检测FoxP3和Collagen- Ⅰ、Collagen- Ⅲ及α-SMA在正常组小鼠、肝纤维化小鼠及Tregs下调肝纤维化小鼠间的表达差异。结果:流式细胞分析显示CD4+CD25+ FoxP3水平在肝纤维化小鼠表达明显升高，注射抗体后表达可降低50％以上。Masson染色显示肝纤维化小鼠肝脏有明显的假小叶，而下调Tregs水平的小鼠肝小叶结构有所恢复，纤维染色减少。同时肝纤维化小鼠肝脏的FoxP3和Collagen- Ⅰ、Collagen- Ⅲ mRNA表达较正常小鼠显著升高，下调CD4+CD25+Tregs水平后，肝纤维化小鼠的FoxP3和Collagen- Ⅰ、Collagen- Ⅲ表达明显下降;α -SMA的mRNA表达也有类似的改变。免疫荧光结果显示Collagen- I和FoxP3双标阳性的细胞在肝纤维化小鼠肝脏明显多于正常对照组小鼠，而下调Tregs水平的小鼠肝脏中双标阳性的细胞明显下降。结论:对于已经形成的肝纤维化，Tregs可能有促进其发展作用;降低体内Tregs水平，可明显缓解肝纤维化的发展。希望该研究能为肝纤维化的治疗提供新的潜在靶点。
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