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用人T急性淋巴细胞白血病Molt-4,人早幼粒白血病细胞HL-60,人慢性粒细胞白血病K562三种白血病细胞系作为模型,分析了云芝糖肽(PSP)组分对白血病细胞的抑制作用。结果显示,PSP组分能时间和剂量依赖性地抑制三种白血病细胞的生长,48h时测得的IC50分别是4.3(Molt-4)、21.8(K562)和25.0μg/ml(HL-60);除抑制生长外,PSP还能直接杀伤白血病细胞,48h时LD50浓度分别为20.4(Molt-4),70.8(HL-60)和198.3μg/ml(K562)。软琼脂克隆法结果显示白血病细胞经5和10μg/ml PSP组分作用48h后,即便除去PSP恢复生长能力也受到显著抑制,10μg/ml PSP处理后克隆抑制率达96.7%(Molt-4)、83.1%(K562)和65.3%(HL-60)。AO/EB荧光染色发现PSP组分能诱导三种不同类型的白血病细胞出现细胞固缩、出泡、形成凋亡小体、产生细胞核碎裂团块等典型凋亡形态特征变化;Annexin-V染色显示细胞膜上出现磷脂酰丝氨酸翻转的典型凋亡标志,均提示凋亡过程参与了PSP诱导的白血病细胞死亡。用丹酰戊二胺(MDC)染色,未见PSP组分能明显诱导自噬溶酶体产生,提示PSP诱导的白血病细胞死亡机制可能与自噬途径无关。细胞直径测量结果发现,一部分细胞在死亡前出现膨大的现象,与凋亡特征相悖。Molt-4细胞平均直径对照组为14.0μm,而PSP组增加到15.8μm(48h,10μg/m L);HL-60细胞直径分别为15.0μm(对照组)和18.5μm(48h,PSP);K562分别为12.2μm(对照组)和15.8μm(48h,PSP),提示有其它死亡方式的存在。用Real time RT-PCR测定炎性程序性死亡的标志——IL-1β和IL-18基因表达,结果显示PSP组分可上调Molt-4细胞IL-1β和IL-18基因表达,水平均对照相比提高了2.5倍(P<0.01),这种上调作用也存在于PSP作用后的HL-60和K562细胞中。ELISA检测结果进一步肯定了PCR的测定结果。Western bolt检测Molt-4细胞中炎性程序性死亡的另一标志物Caspase-1蛋白的表达,结果发现PSP能显著上调caspase-1的水平。这些结果提示,炎性程序性死亡可能也参与了PSP组分诱导的细胞死亡过程。因此,我们认为云芝糖肽抑制白血病的机制可能与同时诱导细胞发生凋亡和炎性程序性死亡有关。