【摘 要】
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目的：采用RNA干扰技术选择性下调大鼠心肌细胞中转录因子Pax-8的表达,来探讨线粒体功能对凋亡的影响.方法：将H9C2(2-1)大鼠胚胎心肌细胞分为3组:实验组为针对Pax-8基因的小干扰
【出 处】
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中华医学会第十五次全国心血管病学大会
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目的：采用RNA干扰技术选择性下调大鼠心肌细胞中转录因子Pax-8的表达,来探讨线粒体功能对凋亡的影响.方法：将H9C2(2-1)大鼠胚胎心肌细胞分为3组:实验组为针对Pax-8基因的小干扰RNA(Pax-8siRNA)组,阴性对照组为非特异性siRNA(NC siRNA)组和空白对照组(BCsiRNA).采用荧光分光光度法检测半胱天冬酶(Caspase-3)活性以反映细胞凋亡,RT-PCR测定Bcl2和Bax的mRNA表达,Western blotting测定Bcl2、Bax和胞浆细胞色素c(Cyto)的蛋白表达,流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位(△Ψm).结果：与NCsiRNA组和BC siRNA组相比较:Pax-8 siRNA组的心肌细胞Caspase-3活性明显升高,Bcl2的mRNA和蛋白的表达明显下调,Bax的mRNA和蛋白的表达显著上调,心肌细胞线粒体释放Cyto至胞浆量明显增加,△Ψm显著下降,上述差异均有统计学意义(P<0.05).而NCsiRNA组与BC siRNA组差异均无统计学意义(P>0.05).结论：Pax-8基因干扰心肌细胞,促进了心肌细胞的凋亡,线粒体功能参与了心肌细胞的凋亡，推测心肌细胞的凋亡可能通过线粒体途径实现。
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