【摘 要】
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目的:NF-κB为结合于免疫球蛋白κ轻链增强子上的核蛋白,由RelA(p65)、RelB、C-Rel、NF-κB1(p50)和NF-κB2(p52)等亚基组成,其中p50/p65最常见,p65与DNA结合后可直接作用于C末端转录元件而激活转录过程.静止期胞浆NF-κB与抑制蛋白I κB形成三聚体.当肝细胞受到肝炎病毒感染时,激活的NF-κB进入胞核与特定κB位点靶基因结合,发挥转录调节和介导免疫、
【机 构】
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南通大学附属医院临床医学研究中心 226001
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目的:NF-κB为结合于免疫球蛋白κ轻链增强子上的核蛋白,由RelA(p65)、RelB、C-Rel、NF-κB1(p50)和NF-κB2(p52)等亚基组成,其中p50/p65最常见,p65与DNA结合后可直接作用于C末端转录元件而激活转录过程.静止期胞浆NF-κB与抑制蛋白I κB形成三聚体.当肝细胞受到肝炎病毒感染时,激活的NF-κB进入胞核与特定κB位点靶基因结合,发挥转录调节和介导免疫、炎症、细胞恶性转化和多药耐药等形成.探讨TNF-α单抗及NF-κ B/p65siRNA干预核因子-κB(NF-κB)活化对肝癌HepG2细胞增殖和细胞膜糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的影响.
方法:体外培养人HepG2细胞并给予抗人TNF-α单克隆抗体,以流式细胞术检测细胞凋亡的情况;设计并合成针对NF-kB/p65siRNA的质粒,在转录水平干扰NF-kB活化,以Western blotting检测P-gp表达.
结果:单抗作用后,肝癌细胞凋亡的比率明显增加(P＜0.01),用药后细胞株NF-κB表达水平明显降低(P＜0.01),与培养液中明显降低的TNF-α水平呈显著正相关(r=0.89,P＜0.01);NF-kB/p65 siRNA干预后可下调化疗药物引起的癌细胞NF-kB和P-gp的过表达.
结论:以TNF-α单体干预肝癌细胞中NF-κB活化,可使细胞凋亡增加,siRNA可通过特异性抑制NF-kB/p65编码的mRNA,下调P-gp水平,促进肝癌细胞凋亡.
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