【摘 要】
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目的随着缺血性脑血管疾病近几年呈现高发病率,年轻化的趋势,因其病因病机复杂,迄今仍是医学界棘手问题。目前针对该类疾病的治疗包括降脂、抗凝、防栓,主要据其病因进行治疗
【基金项目】
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国家自然科学青年基金(81704004);国家自然科学面上基金(81573733);天津中医药大学中西医结合学院教师科研启动基金资助项目(ZXYKY201604)
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目的随着缺血性脑血管疾病近几年呈现高发病率,年轻化的趋势,因其病因病机复杂,迄今仍是医学界棘手问题。目前针对该类疾病的治疗包括降脂、抗凝、防栓,主要据其病因进行治疗。本研究另辟蹊径从稳定新生血管角度对缺血性脑病的病因进行研究。补阳还五汤是中药古方,具有活血、化瘀、通络的功效,现代药理学研究发现其具有抗炎、抗凝血、抗动脉粥样硬化的作用。在稳定血管新生方面尚未有报道。因而实验研究在缺氧条件下补阳还五汤通过调控TGFβ1/Smad4基因信号稳定新生血管的分子机制。方法于体外鼠尾胶基质上种植胸主动脉血管段构建三维培养模型,常氧条件下培养5天后,给予24h缺氧,平行给予补阳还五汤治疗,利用倒置显微镜观察稳定的新生血管生长情况,利用Elisa技术检测新生血管所处培养液中TGFβ1的含量,利用实时定量PCR技术检测新生血管的TGFβ1和Smad4的基因水平,利用蛋白印迹技术检测新生血管的TGFβ1和N-Cadherin的蛋白表达情况。结果各实验组结果显示,倒置显微镜下均可观察到新生血管生成,与正常组相比,模型组中稳定的新生血管数量减少(p<0.05),给予补阳还五汤治疗后稳定的新生血管数量增多(p<0.05);Elisa结果显示与正常组相比,模型组TGFβ1含量明显降低(p<0.01),给予补阳还五汤治疗后TGFβ1含量升高(p<0.05);RT-PCR结果显示与正常组相比,模型组TGFβ1和Smad4m RNA表达下调(p<0.05),经补阳还五汤治疗后TGFβ1和Smad4m RNA表达明显上调(p<0.05);WB结果显示与正常组相比,模型组TGFβ1和N-Cadherin蛋白表达下调(p<0.05),经补阳还五汤治疗后TGFβ1和N-Cadherin蛋白表达上调(p<0.05)。结论在缺氧条件下补阳还五汤调控TFGβ1/Smad4基因水平,启动下游N-Cadherin蛋白形成,进而稳定新生血管形成。
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