8-PN与异黄酮类植物雌激素对成骨细胞和破骨细胞作用比较研究

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目的:8-PN是迄今发现拟雌激素活性最强的植物雌激素,体内外研究提示其对绝经后骨质疏松有保护作用,但其对骨代谢的影响是否强于其他植物雌激素未见详细比较。本研究拟比较8-PN与金雀异黄素、大豆苷元等两种常见异黄酮类植物雌激素对小鼠成骨细胞株MC3T3-E1增殖、分化、矿化过程的影响,以及对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导成破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响。方法:将不同浓度8-PN(10-5,10-6,10-7M)、金雀异黄素(Gen,10-5M)、大豆苷元(Dai,10-5M)分别作用于成骨样细胞MC3T3-E1和破骨样细胞RAW264.7,观察成骨细胞增殖、细胞裂解液ALP活性(PNPP法)和上清液骨钙素浓度(ELISA);矿化结节(28d茜素红法)。RT-PCR检测细胞中RANKL、OPG的mRAN表达变化,ELISA检测上清液中RANKL、OPG的蛋白浓度。药物作用于RAW264.7后分别计数破骨细胞数量以及牛股骨片骨吸收陷窝面积。结果:8-PN不影响成骨细胞的增殖,但可升高分化期MC3T3-E1细胞ALP的活性、培养基骨钙素浓度,促进成骨细胞培养第28天矿化结节的形成,呈一定剂量依赖性。8-PN可剂量依赖性减少RAW264.7分化为破骨细胞的数量以及骨吸收陷窝面积,其促成骨细胞效应及抗骨吸收作用弱于雌激素,强于Gen和Dai。8-PN还可剂量依赖性抑制成骨细胞表达和分泌RANKL,对OPG的表达和分泌有一定促进作用,可降低RANKL/OPG比值。其对RANKL/OPG的调节效应弱于雌二醇,但强于Gen和Dai。结论:8-PN可促进成骨细胞MC3T3-E1分化和矿化,直接抑制RAW264.7破骨细胞样分化和骨吸收,还可通过调节成骨细胞表达和分泌RANKL和OPG来间接调控破骨细胞,其作用强于金雀异黄素、大豆苷元。
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