电穿孔技术体外繁殖人巨细胞病毒

来源 :广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sory520
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  目的 体外快速繁殖人巨细胞病毒.方法 扩增UL82基因,酶切后连接至pcDNA载体,构建pcDNA-pp71质粒;重组质粒转化感受态宿主菌,克隆pcDNA-pp71质粒;抽提及鉴定重组质粒;培养HFF细胞,通过电穿孔技术将BAC-HCMV与pcDNA-pp71共转染HFF细胞;通过细胞病变效应、绿色荧光蛋白及多重PCR鉴定培养后获得的人巨细胞病毒.结果 ①成果构建pcDNA-pp71质粒,双酶切及测序鉴定构建成功.②BAC-HCMV与pcDNA-pp71共转染HFF细胞,细胞转染后出现细胞病变效应及绿色荧光.③多重PCR鉴定产生的病毒为Towne病毒株.结论 应用电穿孔技术成功在体外快速繁殖人巨细胞病毒,为HCMV研究提供实验材料,也为进一步研究HCMV分子机制奠定基础.
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