【摘 要】
：
[目的]采用基于前期实验结果建立的小鼠胚胎干(ES)细胞衍生肝组织炎癌转化评价实验新体系,探索其是否适用于体内成瘤性评价研究.[方法]ES细胞衍生肝组织采用经典的悬滴培
【机 构】
：
浙江大学药学院药理毒理研究所,杭州310058
【出 处】
：
中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]采用基于前期实验结果建立的小鼠胚胎干(ES)细胞衍生肝组织炎癌转化评价实验新体系,探索其是否适用于体内成瘤性评价研究.[方法]ES细胞衍生肝组织采用经典的悬滴培养法,贴壁培养当天(D 5+0)开始持续加入一定浓度的人类致癌剂马兜铃酸-Ⅰ(AAⅠ),肝组织分化成熟(D5+18)时消化成单细胞悬液,以一定的密度注入裸鼠背部皮下,每隔一天观察肿瘤生长及裸鼠健康状况；待肿瘤生长满足如下条件之一即将肿瘤取出制备石蜡切片,HE染色考察肿瘤的组成结构,免疫荧光考察相关标志物的表达情况：1.裸鼠濒死,表现为体重明显减轻、活动明显迟缓等；2.肿瘤出现淤血、破皮、结痂、坏死等；3.荷瘤体积大于1 cm3,且大小相对均一.[结果]溶剂对照(DMSO)组与实验(AAⅠ)组衍生肝组织细胞悬液注入裸鼠背部皮下,均能形成肿瘤,成瘤时间及肿瘤体积无显著性差异.HE染色结果显示,DMSO组肿瘤内细胞类型杂乱无章,呈现明显的畸胎瘤三胚层结构；而AAⅠ组肿瘤内部结构较单一,偶见畸胎瘤结构,大部分细胞呈核大深染的肿瘤细胞特征,提示AAⅠ组肿瘤很可能是来源于同一种细胞的均质瘤.免疫荧光结果显示,在白蛋白(Albumin,ALB)阳染区域内,DMSO组肿瘤未见与甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)、胆管标志物细胞角蛋白7 (Cytokeratin 7,CK7)、细胞角蛋白19 (Cytokeratin 19,CK19)共染的细胞；而AAⅠ组肿瘤出现ALB分别与AFP、CK7、CK19共染的细胞,共染阳性率分别为37.50％,54.17％和50.00％,提示DMSO组肿瘤内的肝细胞均已成熟,其肿瘤很有可能是衍生肝组织中未分化完全的干细胞形成；而AAⅠ组个别肿瘤内的肝细胞较幼稚,呈肿瘤祖/干细胞表型,这些细胞很可能是形成该组肿瘤的源细胞(AAⅠ组其他肿瘤来源待鉴定).[结论]AAⅠ致小鼠ES细胞衍生肝组织炎癌转化体外评价实验体系所获阳性结果,与进一步在体内成瘤性评价结果相吻；为研究肝脏炎癌转化新的分子事件及药物毒性筛选提供了新型实验体系.
其他文献
Objective Toxicity assessment of chemicals is crucial in determining safe levels for human exposure.Current in vivo rodent models of toxicity can no longer meet
[目的]研究不同体外替代方法组合成的分层检测模型对评价化学物眼刺激性的检测效能.[材料和方法]应用鸡胚绒毛膜尿囊膜试验(Hen's egg test on the chorioallantoic memb
[目的]建立人胚胎干细胞向心肌细胞诱导分化的方法,应用诱导分化的心肌细胞检测化合物的心肌细胞毒性.[材料和方法]采用贴壁培养诱导法：按无饲养层培养法培养的人胚胎干细
[目的]构建毒死蜱经口、经皮暴露的毒物代谢动力学和毒效应学(PBTK/TD)模型.[方法]①动物实验：45只成年雄性大鼠一次性经口、经皮联合染毒毒死蜱50/50 mg/kg,给药后0h、1h
[目的]三阴型乳腺癌不表达雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)及人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor2,
氧自由基和DNA的碱基反应可形成8-oxodG,导致G∶C向T∶A突变。为了更好地认识酵母DNA聚合酶Polη在8-oxodG上插入单个dNTP的分子过程,我们采用稳态前动力学方法研究了酵
[目的]探索腹腔注射脂多糖(LPS)致学习与记忆损伤大鼠模型海马不同分区的急性损伤及修复表征.[方法]SD雄性大鼠给予生理盐水及LPS(2 mg/kg)造模后,分别于给药后第1、4、7
[目的]建立经家兔外周血管进行血液灌流(hemoperfusion,HP)的实验动物模型；研究HP对家兔经口摄入毒死蜱(chlorpyrifos,CPF)毒代动力学的影响.[材料和方法]6只健康白色新西
[目的]为了更好地理解前药及其活性产物的体内处置规律,本试验建立并验证了分别定量检测生物样品中前药阿米福韦酯与活性代谢物602076的液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)方法
The standard data requirements of China new chemical registration for substances manufactured or imported in quantifies of 10-100 ton per year, include main