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目的:rhCNB作为重组蛋白类的治疗用生物制品具有一定免疫调节作用,有必要进行免疫毒性评价。小鼠一直是非临床免疫毒性评价的首选动物,而且是rhCNB的相关动物种属。本试验对BALB/c小鼠尾静脉注射给予rhCNB 28 d后,通过对小鼠血液细胞学、免疫器官病理检查、血清细胞因子等免疫毒性指标实验结果分析,判断rhCNB对小鼠是否产生免疫毒性反应。方法:设注射用rhCNB低剂量(20 mg/kg)、中剂量(60 mg/kg)、高剂量(180 mg/kg)和辅料对照4个组,每组48只小鼠,雌雄各半,尾静脉注射给药,各组给药体积20 mL/kg,每日给药1次,连续给药4 w。每天进行一般症状观察,每周称重一次。末次给药后24 h,进行抗药抗体、血常规检查、血清细胞因子(IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ、TNF)、血清补体、循环免疫复合物、T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞数量、自然杀伤细胞数量的检测,钥孔虫戚血蓝蛋白特异性抗体,外周血及骨髓象等指标检查,动物摘眼球处死后对胸腺、脾脏、肾脏、淋巴结等组织器官进行病理检查。结果:试验期间,各组动物一般症状未见异常,雄性小鼠体重增长明显加快(P<0.01)。低剂量组CD4+/CD8+较辅料对照组增大(P<0.05),雌性小鼠低剂量组脾脏脏器系数较辅料对照组增大(P<0.05),该变化未显示剂量相关性。供试品各组动物均有部分动物产生抗药抗体。Th2类细胞因子(IL-4、IL-5)浓度较辅料对照组减少。钥孔虫戚血蓝蛋白抗原致敏后,中剂量组特异性抗体IgG的量较辅料对照组减少。各组动物未检测到循环免疫复合物。各组动物骨髓象未见明显异常。免疫相关组织器官常规HE染色及肾脏PAS染色组织学检查均未见明显的毒性病理改变。结论:本供试品在剂量20 mg/kg/d、60 mg/kg/d和180 mg/kg/d条件下,对雄性小鼠体重增长有一定的促进作用,对小鼠Th2类细胞因子具有一定的下调作用,对T淋巴细胞依赖性抗体反应功能具有一定的抑制作用。综上所述,该供试品对BALB/c小鼠体液免疫具有一定的抑制作用。