【摘 要】
：
本项研究通过重组嗜吞噬细胞无形体的主要外膜蛋白—MSP2,MSP4，以此为抗原建立一种快速诊断人粒细胞无形体的ELISA检测方法。通过基因合成的方法合成了分别来自于瑞士的嗜吞噬细胞无形体ELSA株的MSP2基因、中国ZJ-China株的MSP4基因及美国NY18株的MSP4基因。通过生物信息学分析，筛选了MSP2,MSP4膜蛋白中包含有重要免疫决定簇的膜外区部分氨基酸作为克隆表达的目标，经过引物设
【机 构】
：
新疆石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003
【出 处】
：
2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会
论文部分内容阅读
本项研究通过重组嗜吞噬细胞无形体的主要外膜蛋白—MSP2,MSP4，以此为抗原建立一种快速诊断人粒细胞无形体的ELISA检测方法。通过基因合成的方法合成了分别来自于瑞士的嗜吞噬细胞无形体ELSA株的MSP2基因、中国ZJ-China株的MSP4基因及美国NY18株的MSP4基因。通过生物信息学分析，筛选了MSP2,MSP4膜蛋白中包含有重要免疫决定簇的膜外区部分氨基酸作为克隆表达的目标，经过引物设计，PCR扩增目的片段，连接构建pET32a (+)表达载体并转化至BL21(DE3)表达菌中，以IPTG诱导高效表达目的蛋白，免疫BALE/c小鼠制备多克隆抗体。Western blot分析3株菌MSP2,MSP4重组蛋白与免疫小鼠血清抗体相互间的免疫反应以及交叉反应性。结果表明，表达的重组蛋白ELSA-MSP2和ZJ-MSP4主要以包涵体的形体存在，NY-MSP4可溶性表达及包涵体形式都有。纯化的ZJ-MSP4蛋白，经BCA检测法浓度为8mg/mL。小鼠免疫获得高效抗ZJ-MSP4蛋白抗体。WB分析重组蛋白与抗体存在免疫反应。本研究成功实现了嗜吞噬细胞无形体MSP2蛋白基因片段在体外的重组表达，为进一步研究人粒细胞无形体病的诊断方法奠定了必要的基础。
其他文献
本文针对两个病例，根据阿拉斯加公犬和松狮公犬的临床病症进行了阐述，鉴定诊断为非恶性肿瘤，对其进行手术治疗，术后止血。通过对以上病例的探讨，侧重于“鳞状上皮细胞瘤”。
在家庭养犬实际中，因养犬而带来的一系列问题很多，如偏食、厌食、异嗜、随地大小便、乱扑人等,给犬的主人及其家人带来诸多烦恼。要使所养的犬真正成为"懂礼貌"、"知礼节"、"显风度"的"生活伴侣"，必须纠正犬的不良行为或不良习惯。在仔细分析犬产生以上不良行为的原因的基础上,详细介绍了相应的调教方法。
本文旨在讨论培养和激发犬对训练科目的兴奋性。主要从亲和关系、训导员情绪、强化手段、训练频率、自身体质等几方面来研究,训导员需要用心调整和激发犬的训练积极性和兴奋性，才能达到训练上事半功倍的效果。
Neonatal rat primary myocardial cells were subjected to heat stressin vitro,as a model for investigating the distribution and expression of Hsp27 and αB-crystallin. After exposure to heat stress at 42
为了系统地了解传染性法氏囊病毒TJ－hg株的发生、发展和转归的规律及其发病机理,试验通过对免疫组化条件进行摸索和筛选,建立了检测了IBDV的间接免疫组化方法。通过免疫组织化学法对人工感染鸡不同时间不同器官的分布和带毒期进行了研究。结果表明:感染1 d时,在盲肠、肝脏、心脏和肺脏中检测到IBDV-TJ-hg病毒;感染第3 d时,免疫器官和非免疫器官中均可检测到IBDV-TJ-hg病毒,但在法氏囊、脾
The 37/67-kDa laminin receptor precursor (LRP)/laminin receptor (LR) is a cell surface receptor for cellular prion proteins and misfolded pathological prions. Previous research has shown that blocking
从湖北新洲某鸡场的10日龄患病蛋鸡的腺胃里分离并鉴定一株细菌,同时对病鸡腺胃进行病理组织学观察.结果表明:该菌为革兰氏阴性杆菌,生化反应特性是对甘露醇、β-半乳糖苷酶、葡萄糖、蔗糖、α-葡萄糖、海藻糖、肌醇、山梨醇等反应阳性,对麦芽糖、吲哚、L-阿拉伯糖、D-阿拉伯糖、鼠李糖等反应阴性.通过16SrRNA核苷酸序列分析鉴定为鸭源鸡杆菌.病鸡腺胃增厚,粘膜面乳头明显,镜下粘膜上皮异常增生.分离菌药敏
构建绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因真核表达载体并观察绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在293T细胞中的定位情况,同时探讨其是否可以诱导NIH3T3细胞发生恶性转化。本研究采用RT-PCR技术从自然感染绵羊肺腺瘤病的病羊肺组织中克隆完整的外源性绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因(exJSRV-env),并将其亚克隆到真核表达载体pEGFP-C1中。构建好真核表达质粒经PCR、酶切和测序鉴定。同时对exJSRV-env基因进行生物
本研究从布鲁氏菌的外膜蛋白基因omp25基因入手，构建了缺失omp25基因的流产布鲁氏菌强毒株2308株的基因突变株，使得该菌株不能表达外膜蛋白OMP25，然后用该菌株作用其靶细胞HPT-8细胞，观察探讨缺失omp25基因的布鲁氏菌对细胞自噬的影响，为进一步研究布鲁氏菌如何通过逃逸宿主细胞的免疫杀伤作用在宿主细胞内大量生存繁殖做一些前期工作，为研制新型的布鲁氏菌疫苗做准备工作。结果表明，成功构建了
本文研究了OMP10和OMP19外膜蛋白对小鼠巨噬细胞胞内布氏小体与溶酶体融合的影响以及对其凋亡的影响，为研究布鲁氏菌外膜蛋白对其胞内生存的机制奠定基础。布鲁氏菌△omp10和△omp19具有一定的遗传稳定性，其胞内生存能力与亲本株2308相比有一定程度的下降;△omp10和△omp19与亲本株2308相比两者不能抑制小鼠巨噬细胞内布氏小体与溶酶体的融合;Domp10与亲本株2308相比不能抑制小