【摘 要】
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λ噬菌体ＤＮＡ的复制起始只能在负超螺旋的ＤＮＡ模板上进行。作者采用快速动力学方法确定了λＤＮＡ复制起始途径中依赖ＤＮＡ超螺旋的步骤。首先，在负超螺旋模板上装配λＤＮＡ复制起始途径中先后形成的３个核蛋白复合体，即Ｏ小体、ｏｒｉλ：Ｏ－Ｐ－ＤｎａＢ结构和解链结构；接着，加入过量ＢａｍＨＩ切割模板上远离复制原点的一个独特酶切位点以快速去除模板超螺旋；然后测定上述核蛋白结构复制活性的衰减速度。结果表明，在
【机 构】
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科学院微生物学研究所微生物资源前期开发国家重点实验室 hns Hopkins University
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λ噬菌体ＤＮＡ的复制起始只能在负超螺旋的ＤＮＡ模板上进行。作者采用快速动力学方法确定了λＤＮＡ复制起始途径中依赖ＤＮＡ超螺旋的步骤。首先，在负超螺旋模板上装配λＤＮＡ复制起始途径中先后形成的３个核蛋白复合体，即Ｏ小体、ｏｒｉλ：Ｏ－Ｐ－ＤｎａＢ结构和解链结构；接着，加入过量ＢａｍＨＩ切割模板上远离复制原点的一个独特酶切位点以快速去除模板超螺旋；然后测定上述核蛋白结构复制活性的衰减速度。结果表明，在ＤＮＡ超螺旋状态消失后，Ｏ小体立即失去复制活性，ｏｒｉλ：Ｏ－Ｐ－ＤｎａＢＢ结构的复制活性的衰减缓慢得多，而解链结构则能够更稳定地维持复制活性。根据这些结果，他们推断模板负超螺旋是装配和维持一个具有复制活性的ｏｒｉλ：Ｏ－Ｐ－ＤｎａＢＢ结构所必需的。
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