【摘 要】
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目的 探究细胞接受X射线辐照后通过miRNAs转录后调控对损伤及损伤后修复的分子生物学机制,以建立并完善辐射后损伤-修复模型,在分子层面及细胞层面上对放射防护提供理论支持.方法 选用放射高敏感性的淋巴母细胞T2、TK6两个细胞系经不同剂量X线辐照后,利用MTT及FCM技术于不同时间点对两个细胞系进行细胞生物学检测,构建在梯度辐射剂量下细胞周期、增殖凋亡随时间变化的模型,并通过miRNAs表达芯片
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院
【出 处】
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中华放射学学术大会2016、中华医学会第23次全国放射学学术大会暨中华医学会第24次全国影像技术学术大会
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目的 探究细胞接受X射线辐照后通过miRNAs转录后调控对损伤及损伤后修复的分子生物学机制,以建立并完善辐射后损伤-修复模型,在分子层面及细胞层面上对放射防护提供理论支持.方法 选用放射高敏感性的淋巴母细胞T2、TK6两个细胞系经不同剂量X线辐照后,利用MTT及FCM技术于不同时间点对两个细胞系进行细胞生物学检测,构建在梯度辐射剂量下细胞周期、增殖凋亡随时间变化的模型,并通过miRNAs表达芯片及qPCR技术筛选辐照相关miRNAs,利用靶基因研究及WesternBlot技术构建miRNAs与其靶基因对放射损伤的反馈调节模式图,建立完善的细胞放射损伤后修复模型.结果 let-7家族miRNAs,miR-103b,miR-142,miR-143,miR-146ap,miR-155,miR-15a,miR-16,miR-181a,miR-191,miR-21,miR-22,miR-26a,miR-378,miR-423,miR-92a,miR-93等多种miRNAs随辐照处理后存在显著性低表达趋势(P值≤0.05),后在不同时间点(8h,24h,48h,72h)存在显著性过表达趋势(P值≤0.05).其中let-7家族,miR-92a,miR-143,miR-19b等miRNAs的表达量随时间变化的趋势与细胞周期、凋亡变化趋势无统计学差异(P值≥0.05).其中,靶基因研究表明let-7家族miRNAs通过调控HIFs通路;mir-92a通过调控VEGF/CD31/Tie2通路;mir-143通过调控CD44v3/HGF通路;miR-19b通过调控PGC-1α通路等参与损伤后修复过程.结论 多种miRNAs通过对不同蛋白通路调控,参与体内X线辐射损伤后修复的分子生物学机制.
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