内质网应激参与脑死亡状态下肝损伤的分子机制研究

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<正>目的研究脑死亡状态下是否启动内质网应激,并且内质网应激是否参与脑死亡状态下的肝损伤。方法选取健康清洁级雄性SD大鼠36只,200—250g,随机分为2组,即脑死亡组(B组n=30):应用缓慢间歇颅内加压法建立脑死亡模型并维持脑死亡状态0h、1h、2h、4h及6h,每个时间点6只大鼠;假手术组(C):颅内置入Fogarty管,但是不诱导脑死亡。通过血清检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的表达水平。Western blot检测Grp78、Xbp-1、Chop及Caspase-12蛋白的表达;荧光定量PCR检测其mRNA的转录水平;应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测大鼠肝脏细胞中的凋亡。结果脑死亡6h时B组血清水平ALT和AST显著高于C组,差异具有统计学意义(P<0.05),并且ALT的水平随着脑死亡时间的增加逐渐增高,AST在脑死亡4小时时最高。Grp78、Xbp-1、Chop及Caspase-12蛋白在B组中的表达显著高于C组,差异具有统计学意义(P<0.05),蛋白在脑死亡6h时表达水平最高。qPCR示mRNA的表达B组与C组的差异
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