猪Th1型细胞因子IL-2、IL-12p40和IFN-γ SYBR Green I real-time PCR检测方法的建立

来源 :广西畜牧兽医学会养猪学分会2009年年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sad_pacific
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
针对猪Th1型细胞因子IL-2、IL-12p40、IFN-γ以及管家基因β-actin的基因序列分别设计一对特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测IL-2、IL-12p40、IFN-γ及β-actin的SYBR Green I teal-timePCR方法。该方法线性关系好,标准曲线的相关系数均达到0.997以上;敏感性高,初始模板的检出下限均达到1×10拷贝/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,组内与组间的变异系数均小于3.5%。 应用所建立的方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪外周血单个核细胞中IL-2、IL-12p40和IFN-γ mRNA的表达水平进行检测。结果表明,所建立的real-timePCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于猪Th1型细胞因子的检测及定量分析。
其他文献
猪场具有老鼠繁殖和生存的良好条件,它吃掉饲料、破坏设施、传播疾病等的危害极为严重。一个中等鼠害的万头猪场,每年被老鼠吃掉的饲料就超过40吨,损失超过10万元。通过对猪场害
对猪源脑心肌炎病毒(EMCV)GXLC株进行全基冈组克隆、测序和分析。采用RT-PCR技术分段扩增基因组开放阅读框(ORF),应用3’-RACE和5’-RACE技术扩增3’-UTR和5’-UTR,分别对扩增
会议
随着我国社会经济的快速发展,建筑行业得到了快速的发展。随着人们生活水平和质量的提高,节能环保理念的深入,人们对建筑质量关注的同时,对节能环保有了更高的要求。装配式建筑主
pH值是消毒剂自身固有特性,有时要根据pH值选择消毒剂。通过抽检各猪场使用的消毒剂和结合实验室对常规消毒剂的检测中,发现为过硫酸氢钾类、二氧化氯类、煤焦油酸类、聚维酮碘
在将绿色建筑施工技术应用在建筑施工的过程中,有利于促进建筑行业的进一步发展,满足人们的居住需求,提高居住体验,实现环保功能,提高资源利用率,有利于为国家的健康发展做出
近年来,养猪业飞速发展,规模化程度越来越高,给环境造成的污染也越来越严重。随着环保意识的加强,各级政府和社会舆论频频给养猪企业加压,极力要求解决养猪生产过程中带来的环境污
会议
目前,我国对可持续发展理念进行了贯彻和落实,将其应用于建筑工程中出现了绿色施工技术,加大对绿色施工技术的应用能够促进我国建设工程的稳定长远发展。其兼顾了生态效益、
随着社会的发展,本文就阐述了有关林业病虫害发生的原因,从生物防治手段,物理防治手段,化学防治手段三个方面,探讨了高新技术防治林业病虫害应用策略,希望对提升高新技术防治林业病
10月7日19时,瑞典学院公布了2010年诺贝尔文学奖得主,秘鲁作家巴尔加斯·略萨获此殊荣,这也是诺贝尔文学奖时隔28年后又一次青睐南美作家。哥伦比亚著名作家加西亚·马尔克斯
目前市场上的消毒剂品种繁多,质量好坏参差不齐,一般的养猪场很难对消毒剂的实际使用效果进行评估,多数以厂家品牌的信誉度或参考其他猪场进行选择。 实际一个消毒剂必须要通
会议