【摘 要】
：
根据GenBank发布的PRRSV VR2332株ORF7的全长基因序列,设计一对特异性引物,应用RT-PCR扩增出完整的ORF7基因,将PCR产物克隆入pMD-18T载体,进行测序分析。双酶切测序后重组质
【机 构】
：
辽宁出入境检验检疫局; 大连工业大学生物与食品工程学院;
【基金项目】
：
东莞市2008年科研专项经费项目(2007108101100)
论文部分内容阅读
根据GenBank发布的PRRSV VR2332株ORF7的全长基因序列,设计一对特异性引物,应用RT-PCR扩增出完整的ORF7基因,将PCR产物克隆入pMD-18T载体,进行测序分析。双酶切测序后重组质粒pMD-18T-N得到目的片段连接至原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组质粒pET-28a(+)-N。再转化至BL21宿主菌,对诱导表达条件(IPTG浓度、诱导时间、诱导温度)进行优化,结果在37℃,0.2 mmol/LIPTG诱导5 h可实现重组N蛋白的高效表达。该重组N蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,Western-blotting分析显示,重组N蛋白与PRRSV阳性血清发生特异性反应。综上所述,本试验制备的重组N蛋白具有良好的免疫学反应活性,这为猪繁殖与呼吸综合征病毒的血清学诊断方法的建立奠定了基础。
其他文献
按音乐学应用型人才培养的要求，音乐学专业学生在校期间应该有目的、有针对性地进行专业学习和能力训练，使之成为适应社会需求的音乐教育工作者。
可视化技术和工具是大数据时代管理和理解海量微博数据的重要手段。文章介绍了国内现有的微博传播可视化工具，从可视化图形设计、用户分析、传播分析这三个方面，通过实例分析的
我国的教师教育体制起步于动荡不安的清朝末年,历经新中国成立后的形成发展阶段,现如今正处于体制的变革时期。在此百余年间,受政治、经济多方面的影响,教师教育体制在不同的
很多非对称密码算法都使用素数,有些算法的安全性完全基于素数的质量和保密性.而生成大素数是非常耗时的,因此研究素数的快速生成是必要的.本文总结对比近年来提出的快速素数
跳远是一项技术复杂且比较特殊的运动项目,运动员只有在助跑准确的前提下充分发挥自己最大的体能,才能获得最好的成绩。跳远成绩高低的决定因素是在助跑起跳过程中减少不必要
<正>穿过文字的丛林读古典的难处,在于语言障碍。所以从古到今那么多学者为破除障碍付出劳动,青灯黄卷,夜以继日,像对出土文物一样,怀着虔敬之心。像《诗经》《楚辞》,大概很
目的：探讨有机磷农药食物中毒发生的对策。方法：采用现场流行病学调查、卫生学调查和实验室检测方法进行调查分析。结果：累计报告病例20例,且在病例呕吐物中检测出特丁磷、氯氟
目的:评估细菌脂多糖(LPS)在体外环境下对中华绒螯蟹血细胞凋亡的影响,并探讨其诱导血细胞凋亡的机制。创新点:首次在体外条件下实验证明了LPS可诱导中华绒螯蟹血细胞的凋亡,
众所周知,计算是一项极为重要的智力行为,而计算能力是人们所必须掌握的一种基础能力,是数学教学过程中综合水平的展现。在中职教学过程中,对中职生的计算能力进行培养,是一