【摘 要】
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目的:在HepG2细胞中研究CYP3A4*1G对人CYP3A4启动子转录调控的影响.方法:采用增强子和启动子双荧光素酶报告基因技术在HepG2细胞中分析一系列携带CYP3A4*1GG或ADNA片段(内含
【出 处】
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全国第四次麻醉药理学学术会议暨2013年贵州省麻醉学术年会
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目的:在HepG2细胞中研究CYP3A4*1G对人CYP3A4启动子转录调控的影响.方法:采用增强子和启动子双荧光素酶报告基因技术在HepG2细胞中分析一系列携带CYP3A4*1GG或ADNA片段(内含子10全长1587bp、外显子10与内含子10交界处181bp和287bp)的荧光素酶活性.结果:①CYP3A4*1G 1587 bpG对CYP3A4启动子的转录增强作用和增强程度具有位置和方向依赖性,而1587 bp A对CYP3A4启动子的转录增强作用和增强程度与位置和方向均无关.②1587bpG或A均显示启动子活性,且后者的启动子活性强于前者及CYP3A4启动子的活性.③SV 40增强子对1587 bp G或A均具有明显的转录增强作用,但其对1587 bp A的转录增强程度明显低于1587bp G.④287 bp G或A、181bpG或A均显著抑制CYP3A4启动子活性,且287 bp G与A或181 bpG与A之间对CYP3A4启动子活性的抑制程度均无显著性差异;相同条件下1587 bp G对CYP3A4启动子转录活性无影响,而1587 bp A具有明显的转录增强作用.结论:在HepG2细胞中,CYP3A4*1G在内含子10全长中是具有独特的等位基因依赖性的增强子和启动子;SV40增强子对该内含子启动子的增强程度具有等位基因依赖性;CYP3A4*1G位点附近存在CYP3A4启动子的抑制元件或CYP3A4启动子和CYP3A4*1G增强子的抑制元件(绝缘子).
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