Snail/CXCL-8轴促进大肠癌细胞表达CD58和维持干细胞特性

来源 :中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sketchupbim
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研究背景:CD58是一个重要的免疫分子,通过与CD2分子的相互作用而促进肠粘膜上皮内淋巴细胞分泌CXCL-8.我们在先前研究中发现CD58也是一个新的大肠癌干细胞标志分子,然CD58介导的CXCL-8与CD58+大肠癌细胞干细胞特征间的关系目前尚不明确.目的:探索CD58介导的CXCL-8参与调控CD58+大肠癌细胞干细胞特性和自我更新的分子机制.方法:大肠癌P1和HT29细胞经磁珠分选制备CD44+和CD44-细胞,Western blotting比较两群细胞Snail 表达水平.以Snail质粒或对照载体转染SGC7901和293T细胞,Western blotting检测CD58表达水平,同时构建CD58启动子/pGL3荧光素酶报告基因重组质粒,将Snail质粒或对照载体与上述重组质粒分别共转染SGC7901和293T细胞检测荧光活性.在去除CD4+T细胞的CD2+T细胞中加入P1细胞共培养,ELISA比较作用组和对照组培养上清CXCL-8浓度,慢病毒感染构建CXCL-8敲低P1和SW620细胞,比较CXCL-8敲低组与对照组克隆球形成率.
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