【摘 要】
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目的：研究miRNA在室间隔缺损发病中的作用.方法：(1)使用real-time RT-PCR对样本(9例正常,40例室间隔缺损心肌组织)中30个候选miRNA(先天性心脏病患者标本miRNA芯片结果筛选出的
【机 构】
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复旦大学附属儿科医院心血管中心 201102
【出 处】
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中华医学会第十八次全国儿科学术会议
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目的：研究miRNA在室间隔缺损发病中的作用.方法：(1)使用real-time RT-PCR对样本(9例正常,40例室间隔缺损心肌组织)中30个候选miRNA(先天性心脏病患者标本miRNA芯片结果筛选出的有差异miRNA)进行实时定量检测,确定在先心患者心肌组织中异常表达的miRNA.(2)使用生物信息学方法预测有差异表达miRNA(miRNA-1-1和miRNA-181c)的候选靶基因,并用realtime RT-PCR检测候选靶基因的表达情况.miRNA-1-1的候选靶基因有:EGFR,GJA1,MED1,TGFBR3,SOX9,CITED2,EDN1,PAX3,RARB,SMAD2,SRI等.miRNA-181c的候选靶基因有:SEMA3C,ACVR2B,ADM,ADRBK1,COL5A1,SMAD7,PDGFRA,VCAM1,BMPR2,NF1,HAND2等.(3)通过3-UTR luciferase报告基因分析、免疫组化以及靶基因大鼠H9C2成纤维的外源性验证,以确定miR-1-1及miR-181c对初筛靶基因的调控作用.结果：与正常心脏组织比较,miR-1-1在室间隔缺损心脏组织中表达降低,miR-181c在室间隔缺损心脏组织中表达升高;Sox9和GJA1在室间隔缺损心脏组织中表达升高,BMPR2在室间隔缺损心脏组织中表达降低.结论：miR-181c和miR-1-1在室间隔缺损的形成过程中可能发挥重要作用.
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