【摘 要】
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目的：改进小鼠局部淋巴结实验(LLNA),建立既可检测化学物的致敏性也可同时检测刺激性的LLNA替代方法。方法：按常规LLNA方法对雌性Balb/c小鼠进行染毒,测量小鼠耳缘厚度并称量耳廓重量,于第6天获取耳引流淋巴结进行称重,制备单细胞悬液计数并用cck-8试剂盒检测淋巴细胞增殖活性。选取一种阴性物质：4-氨苯甲酸;三种致敏阳性物:2,4二硝基氯苯(DNCB)、己基肉桂醛(HCA)和2-氨基酚(
【机 构】
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第二军医大学卫生毒理学教研室,上海 200433 上海市进出口检验检疫局
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目的：改进小鼠局部淋巴结实验(LLNA),建立既可检测化学物的致敏性也可同时检测刺激性的LLNA替代方法。
方法：按常规LLNA方法对雌性Balb/c小鼠进行染毒,测量小鼠耳缘厚度并称量耳廓重量,于第6天获取耳引流淋巴结进行称重,制备单细胞悬液计数并用cck-8试剂盒检测淋巴细胞增殖活性。选取一种阴性物质：4-氨苯甲酸;三种致敏阳性物:2,4二硝基氯苯(DNCB)、己基肉桂醛(HCA)和2-氨基酚(2-APC)以及一种刺激阳性物：氢氧化钾(KOH)。
结果：受试剂量氢氧化钾和2,4-二硝基氯苯在0.5％以上剂量,可引起耳缘厚度和耳廓重量增加,与对照组相比差异有显著性(P＜0.05),可能判定为对皮肤有刺激性；2-氨基酚和己基肉桂醛均无刺激性。三种致敏物在致敏实验中均呈阳性,但不同检测指标敏感性有差异。己基肉桂醛,2,4-二硝基氯苯,2-氨基酚均可引起淋巴结重量增加,并异有显著性(P＜0.05)；2,4-二硝基氯苯和己基肉桂醛可引起淋巴细胞计数增加,但己基肉桂醛仅在最高剂量组有统计学差异；己基肉桂醛和2,4-二硝基氯苯在中剂量以上组均可致cck-8检测的淋巴细胞增殖明显增加,氢氧化钾在致敏性指标中均为阴性。
结论：以耳缘厚度和耳廓重量作为刺激性观察指标,以淋巴结重量和淋巴细胞增殖作为致敏性观察指标的改良小鼠淋巴结实验可有效地同时评价化学物的皮肤致敏性和刺激性,有发展成为一种替代方法的潜力。
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